1、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，包括兒茶酚胺類和吲哚乙酸類，在評(píng)價(jià)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的活性，解釋疾病發(fā)病機(jī)制和診斷許多疾病起著至關(guān)重要的作用。兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)與人類的疾病密切相關(guān)，主要包括去甲腎上腺素(NE)，腎上腺素(EP)和多巴胺(DA)。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)在體內(nèi)的含量高或低均可導(dǎo)致一些疾病，例如腦中多巴胺的缺少導(dǎo)致帕金森病和精神分裂癥。作為主要的吲哚乙酸類神經(jīng)遞質(zhì)，5-羥色胺(5-HT)與抑郁癥和偏頭痛等神經(jīng)系統(tǒng)疾病有著密切的聯(lián)系。由于這些神經(jīng)遞質(zhì)在診斷

2、和治療疾病過(guò)程中的重要作用，因此有必要建立一個(gè)簡(jiǎn)單、快速、靈敏的檢測(cè)方法。然而，這些神經(jīng)遞質(zhì)在體內(nèi)含量低且容易被氧化，開(kāi)發(fā)一種新的分離分析方法仍舊是一種巨大的挑戰(zhàn)。
　　尿酸是嘌呤代謝的最終產(chǎn)物，正常人體內(nèi)含量在0.13-0.46mM之間，高尿酸血癥與血液和尿液中的尿酸含量有著密切的關(guān)系，并且可以導(dǎo)致一系列的并發(fā)癥，例如關(guān)節(jié)炎，心血管疾病及神經(jīng)疾病等。因此，頻繁的檢測(cè)和嚴(yán)格的控制血液和尿液中的尿酸濃度有利于阻止高尿酸血癥和降低并發(fā)

3、癥的發(fā)生。已經(jīng)報(bào)道的檢測(cè)尿酸的分析方法包括化學(xué)發(fā)光法，熒光法，電化學(xué)發(fā)，高效液相色譜法和毛細(xì)血管法。在這些方法中，有的方法缺乏分析選擇性，而有的方法存在著耗時(shí)等缺點(diǎn)。例如，生物樣品中與尿酸共存的抗壞血酸可影響尿酸的檢測(cè)，因?yàn)檫@兩種化合物有著相同的氧化電位。因此，在臨床上診斷和治療高尿酸血癥過(guò)程中，有必要建立一個(gè)選擇性好和靈敏度高的檢測(cè)尿酸的方法。
　　化學(xué)發(fā)光是近些年發(fā)展起來(lái)的一種新的檢測(cè)器，其靈敏度高、儀器簡(jiǎn)單便宜和可以與分離手

4、段如高效液相色譜聯(lián)用倍受青睞，特別是近些年與貴金屬納米的聯(lián)用檢測(cè)痕量物質(zhì)成為一種新的方法。本文首次建立HPLC偶聯(lián)Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光方法，該體系可同時(shí)檢測(cè)NE，EP，DA和5-HT，并對(duì)該體系影響因素進(jìn)行了探討，利用紫外光譜探討了其發(fā)光的機(jī)制并且將該體系應(yīng)用到大鼠腦中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的檢測(cè)。另外，比色法傳感器由于其儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、待測(cè)物無(wú)需純化、可實(shí)時(shí)檢測(cè)反應(yīng)的動(dòng)態(tài)過(guò)程等特性是研究熱點(diǎn)之一。本研究基于尿酸酶與尿酸的酶促反應(yīng)和三角形納

5、米銀片的表面等離子體共振，建立起檢測(cè)人體血中尿酸的含量。與其他檢測(cè)尿酸的方法比較，該方法具有原理簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器以及低的技術(shù)要求等特點(diǎn)，并成功地運(yùn)用到檢測(cè)人血液中尿酸的含量。具體工作如下：
　　第一部分：高效液相色譜偶聯(lián)[Ag(HIO6)2]5--魯米諾化學(xué)發(fā)光體系檢測(cè)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)
　　本研究基于[Ag(HIO6)2]5--魯米諾化學(xué)發(fā)光體系，建立了同時(shí)檢測(cè)大鼠腦中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的簡(jiǎn)單快速的化學(xué)發(fā)光分析法。這是首次將

6、[Ag(HIO6)2]5--魯米諾化學(xué)發(fā)光體系與高效液相色譜聯(lián)用。在堿性溶液中，去甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(EP)、多巴胺(DA)和5-羥色胺(5-HT)能顯著增強(qiáng)[Ag(HIO6)2]5--魯米諾化學(xué)發(fā)光體系。實(shí)驗(yàn)研究了高效液相色譜的分離條件，[Ag(HIO6)2]5-和魯米諾的濃度以及pH值對(duì)于發(fā)光體系的影響。結(jié)果顯示，液相色譜條件在甲醇：0.2％磷酸為5:95的條件下等度洗脫，11min內(nèi)能夠?qū)E、EP、DA和5-HT分開(kāi)。

7、在最優(yōu)的化學(xué)發(fā)光條件下，本體系對(duì)NE、EP、DA和5-HT的檢測(cè)限分別為4.8、0.88、1.9和2.3ng/mL。利用本法成功測(cè)定了大鼠腦中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量，回收率超過(guò)93.4%，日內(nèi)和日間精密度均小于6.0%。
　　第二部分基于三角形納米銀片-尿酸酶侵蝕原理的比色法高選擇性和高靈敏度的檢測(cè)人體血液中的尿酸含量
　　由于尿酸在生理和病理進(jìn)程中的關(guān)鍵作用，直接選擇性的和靈敏度的傳感人體血液中的尿酸含量是非常重要的。因此，

8、本文建立了一個(gè)簡(jiǎn)單而又有效的尿酸傳感，主要是基于三角形納米銀片的形態(tài)改變來(lái)比色傳感尿酸?；驹硎窃谀蛩崦傅拇嬖?，尿酸被氧化產(chǎn)生H2O2，三角形納米銀片被H2O2侵蝕由三角形轉(zhuǎn)變成球形，導(dǎo)致超過(guò)120 nm紫外吸收峰的藍(lán)移。溶液的顏色與尿酸的濃度有關(guān)，且可以通過(guò)肉眼觀察到顏色變化由淡藍(lán)色變成紫色。三角形納米銀片的表面等離子體共振藍(lán)移程度和尿酸的濃度在1.0到40μM范圍內(nèi)成線性相關(guān)，檢測(cè)限為0.7μM。選擇性實(shí)驗(yàn)表明在血液中一些潛在的干

9、擾物質(zhì)沒(méi)有干擾。血樣本離心后可直接加入到三角形納米銀片?尿酸酶體系中而不需要其他處理。三角形納米銀片-尿酸酶?jìng)鞲衅鞒晒Φ剡\(yùn)用到人體血液中尿酸的檢測(cè)，回收率在95%以上。測(cè)得的結(jié)果與生化分析儀器進(jìn)行對(duì)比，相對(duì)誤差為5.1%。整個(gè)實(shí)驗(yàn)可以在一個(gè)小時(shí)之內(nèi)完成且不需要昂貴的儀器，從而避免了現(xiàn)有方法的耗時(shí)和使用頂尖的裝備等缺陷。該生物傳感器具有選擇性好和靈敏度高，簡(jiǎn)單的樣品處理，低消耗和快速檢測(cè)等特點(diǎn)。因此，該方法在生物分析和臨床診斷中具有很大潛