棉鈴蟲核型多角體病毒ORF34、ORF44的序列分析與原核表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、棉鈴蟲核型多角體病毒(HearNPV)可特異性侵染棉鈴蟲,是理想的棉鈴蟲生物防治因子。HearNPV的兩個分離株C1、G4的基因組全序列已經(jīng)測定。一些基因的功能已經(jīng)闡明,ORF34、ORF44是兩個功能未知的基因,本研究對ORF34、44基因進行了克隆、序列分析和原核表達研究,首次分析并確認了HearNPV的ORF34、ORF44基因為HearNPV的特有基因,基因表達產(chǎn)物也為后續(xù)研究提供了基礎。 HearNPV ORF34基因

2、全長1080nt,編碼359aa,預測編碼蛋白分子量為41.2 kDa。序列分析顯示,ORF34具有三個桿狀病毒早期基因轉錄啟動子特征序列。分析發(fā)現(xiàn)ORF34的推導氨基酸序列中含有1個強跨膜螺旋區(qū)域,15個磷酸化位點和1個糖基化位點。除HezeNPV ORF34外,未發(fā)現(xiàn)與ORF34氨基酸同源性高于30%的基因。構建了pET-34表達載體,并在大腸桿菌BL21中得到了表達,表達的融合蛋白分子量為42kDa,與預測編碼蛋白分子量大小相符。

3、序列分析研究結果表明ORF34是HearNPV的一個特有基因。 HearNPV ORF44基因全長1137nt,編碼378aa,預測編碼蛋白分子量為42.7kDa。序列分析顯示,ORF44具有雙相啟動子特征序列,同時兼有桿狀病毒早期和晚期基因轉錄啟動子特征序列。分析發(fā)現(xiàn)ORF44的推導氨基酸序列中含有1個強跨膜螺旋區(qū)域,32個磷酸化位點和4個糖基化位點。除HezeNPV ORF45外,未發(fā)現(xiàn)與ORF44氨基酸同源性高于30%的基

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