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![芡實殼三萜類提取物降血糖及其改善胰島素抵抗作用研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/eca055a9-15ad-488e-91a1-f72086f19af0/eca055a9-15ad-488e-91a1-f72086f19af01.gif)
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文檔簡介
1、芡實是一年生水生草本植物芡(EuryaleferoxSalisb.)的成熟種仁,是睡蓮科(Nymphaeaceae)芡屬植物,芡實原產(chǎn)東亞和印度,我國主產(chǎn)于河南、安徽、湖北等地,產(chǎn)量多而且資源豐富。芡實為藥食同源植物,藥用價值極高。芡實的種仁外面包有芡實硬殼,生產(chǎn)中將芡實殼去除,芡實殼資源廢棄而未得到利用。本研究主要對食品工業(yè)生產(chǎn)中廢棄的芡實外殼的成分進行研究,并對其提取物的降血糖及其胰島素抵抗分子機制進行了探索,為后續(xù)的芡實殼綜合開發(fā)
2、利用提供實驗依據(jù)支持。
本研究采用70%濃度的乙醇作為溶劑,將芡實殼粉碎后,在65℃下用乙醇水浴提取3次,每次16h,減壓回收乙醇后,與水混懸,依次用石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取,得到活性物質(zhì)。采用紫外分光光度法對芡實殼提取物成分進行初步測定,利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)對提取物復(fù)雜成分進行了分離和定性。在動物體內(nèi)試驗中,通過鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)得到穩(wěn)定可靠的高血糖模型,通過檢測各組小鼠灌胃前后的體重、血
3、糖、血清胰島素、血脂水平,分析臟器指數(shù),胰島素敏感指數(shù)等指標,評價芡實殼提取物的降血糖效果。利用RT-PCR方法檢測小鼠肝臟組織中叉頭轉(zhuǎn)錄因子(Fox01)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)、胰島素信號通路蛋白(PKB)基因表達;利用酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測其相對應(yīng)的蛋白水平,闡述芡實殼提取物對胰島素抵抗信號傳導(dǎo)通路相關(guān)基因表達的影響。
結(jié)果表明,以5%香草醛—冰乙酸和高氯酸為顯色劑,在548nm測定樣品的吸光度,芡實殼提取物中三萜含
4、量占樣品總量的36.7%。通過LC-MS測定提取物的分子量,結(jié)合文獻報道,主要成分的分子量定位在326和512左右,推測分子式可能是C23H18O13和C25H20O12。富含三萜的芡實殼提取物能夠明顯改善高血糖小鼠的體重減輕的癥狀,可以抑制高血糖小鼠肝臟、腎臟和脾臟因病變發(fā)生的腫大,血清中C肽(C-P)含量和胰島素敏感指數(shù)(ISI)明顯升高(p<0.05)。與未處理的高血糖小鼠相比,芡實殼三萜類提取物能夠顯著降低血清中總膽固醇(TC)
5、、低密度脂蛋白(LDL-C)和甘油三酯(TG)水平(p<0.05),高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)則顯著升高(p<0.01)。芡實殼三萜類提取物可以提高組織中胰島素抵抗相關(guān)基因PI-3K、PKB的基因表達,可以顯著上調(diào)組織中PI-3K和PKB的蛋白表達(p<0.05),同時抑制轉(zhuǎn)錄因子Fox01的基因和蛋白的表達。
綜上所述,70%芡實殼乙醇提取物經(jīng)過有機相萃取后含有豐富的三萜類物質(zhì)。這些活性物質(zhì)可以改善高血糖小鼠糖代謝、脂
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