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文檔簡介
1、研究目的:
本實驗的目的在于初步闡明茶多酚對原發(fā)性開角型青光眼來源的小梁細胞有抗氧化損傷的作用。并為茶多酚在眼科其他領(lǐng)域的運用提供實驗依據(jù)。
方法:
1、材料:復蘇后傳3-5代GTC置于DMEM應用液,于5%CO2的37℃條件下培養(yǎng)。
2、實驗分組:將處于對數(shù)生長期的GTC隨機分為4組,對照組,實驗組1、2、3,其中實驗組1、2、3分別添加濃度為5、10、20 mg/L的TP,對照組加入等量的DM
2、EM應用液,加入TP培養(yǎng)24小時后,采用蛋白免疫印跡法即蛋白質(zhì)印跡雜交(Western blot法)測定各組小梁細胞胞色素C(Cytochromec,CytC)的釋放,采用熒光定量多聚酶鏈反應(Fluorescence quantitative PCR)測定各組小梁細胞復合物I信使核糖核酸(Complex I Messenger RNA, Complex ImRNA)的表達水平,采用流式細胞術(shù)測定各組小梁細胞的細胞凋亡率。
結(jié)
3、果:
1、TP對小梁細胞生長的影響
與POAG組相比,各茶多酚組細胞凋亡率均降低,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);不同濃度的茶多酚組間隨著茶多酚濃度的增加,細胞凋亡率隨之下降,各濃度組間的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)
2、Western blot法測定各組小粱細胞CytC的釋放
與POAG組相比,各茶多酚組CytC的釋放均降低,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);不同濃度茶多酚組間隨茶多
4、酚濃度增加CytC的釋放下降,各濃度組間的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)
3、熒光定量PCR測定各組小梁細胞Complex I mRNA的表達水平
與對照組相比,各茶多酚組complex I mRNA表達均增加,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);不同濃度茶多酚組間隨茶多酚濃度增加complex I mRNA表達增加,各濃度組間的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);
結(jié)論:
1、外源性茶多酚對
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