1、樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)是最強(qiáng)的抗原提成細(xì)胞,未成熟DC具有識(shí)別和攝取抗原的作用,而只有成熟DC才具有提成抗原的作用。成熟的DC細(xì)胞可以激活T淋巴細(xì)胞,使T淋巴細(xì)胞向Th2方向轉(zhuǎn)化,并且分泌細(xì)胞因子如IL-4、IL-5、IL-13等。而Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子主要是IL-2、INF-γ、TNF-β等。目前普遍認(rèn)為哮喘是由Th2細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)的的過(guò)敏反應(yīng)。在DC的成熟過(guò)程中,酪氨酸蛋白激酶SyK起著關(guān)鍵作用,若沒(méi)有SyK,則DC細(xì)胞不能成熟,也就不

2、能發(fā)揮抗原遞呈的功能,參與哮喘的各種細(xì)胞因子也就不能被炎癥細(xì)胞所分泌。所以,靶向阻斷酪氨酸蛋白激酶SyK有望成為治療支氣管哮喘的新途徑。
　　 我們使用化學(xué)合成的21-23bp的小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞酪氨酸蛋白激酶SyK基因RNA片段,以Lipofactomin2000作為轉(zhuǎn)染試劑,將合成的RNA片段轉(zhuǎn)染進(jìn)哮喘小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞,作用48小時(shí)后再與正常小鼠脾臟來(lái)源的T淋巴細(xì)胞混合反應(yīng)48小時(shí),之后用ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子IL-4、IL-13

3、、IL-2、INF-γ。用Western Blot檢測(cè)酪氨酸蛋白激酶SyK的含量,從而檢測(cè)SyK基因是否被沉默。結(jié)果顯示,siRNA干擾組幾乎檢測(cè)不到小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞酪氨酸蛋白激酶SyK的,siRNA干擾組IL-4、IL-13的水平較對(duì)照組明顯下降,數(shù)據(jù)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本實(shí)驗(yàn)采用siRNA的方法沉默了酪氨酸蛋白激酶SyK的基因表達(dá),阻斷了DC的成熟,使之不能發(fā)揮抗原遞呈功能,本次實(shí)驗(yàn)證實(shí)此項(xiàng)作用。
　　 在這項(xiàng)研究中使用siRNA