Apelin-13促進(jìn)臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞分化成血管網(wǎng).pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  探索apelin對(duì)干細(xì)胞定向血管網(wǎng)分化的調(diào)控作用。
  方法:
  采用組織塊貼壁法從人臍帶華通膠組織中分離間充質(zhì)干細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)其免疫表型。取第3代人華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞,分別接種于4個(gè)培養(yǎng)瓶中,記為A1,A2,A3,A4組,用誘導(dǎo)液誘導(dǎo)7天,每天向 A2,A3,A4組中分別加入濃度1×10-6,10×10-6,100×10-6 mol/L的apelin-1320微升,向A1中加入20微升的空白DME

2、M-F12培養(yǎng)基,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)情況,并對(duì)其進(jìn)行血管性血友病因子抗體(vWF)免疫熒光染色及CD31流式細(xì)胞學(xué)鑒定。使用水凝膠的三維培養(yǎng)基對(duì)誘導(dǎo)后的內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),并按照原A1,A2,A3,A4組的順序重新依次編號(hào)為S1,S2,S3,S4四組。每天分別向S2,S3,S4組中加入濃度1×10-6,10×10-6,100×10-6 mol/L的apelin-1320微升,S1中加入20微升的DMEM-F12作為空白對(duì)照組。

3、7天后,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)情況及在三維培養(yǎng)基中形成血管樣結(jié)構(gòu)情況。
  結(jié)果:
  人華通膠源間充質(zhì)干細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化為vWF免疫熒光染色陽(yáng)性的內(nèi)皮樣細(xì)胞。隨著apelin-13蛋白濃度的增加,CD31陽(yáng)性表達(dá)率也隨之升高。顯微鏡下觀察到內(nèi)皮樣細(xì)胞在水凝膠的三維培養(yǎng)基中能夠形成血管樣結(jié)構(gòu)。
  結(jié)論:
  本研究證實(shí)apelin可調(diào)控hUC-MSCs向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化,apelin-13呈劑量依賴性

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