1、特發(fā)性炎性肌病(idiopathic inflammatory myopathies,IIM)是一組以慢性肌肉炎癥反應導致進行性肌萎縮為特點的系統(tǒng)性自身免疫病,主要包括多發(fā)性肌炎(polymyositis,PM)和皮肌炎(dennatomyositis,DM)。由于病因和病理機制不明,PM/DM的臨床治療仍以激素和免疫抑制劑為主,缺乏特異性,臨床上出現(xiàn)大量的藥物毒副作用。只有通過尋找PM/DM的發(fā)病機理,明確疾病發(fā)生、發(fā)展關鍵的免疫調(diào)節(jié)

2、通路,才能從中找到PM/DM特異性診斷和病情活動性指標以及藥物治療的靶點,為臨床治愈PM/DM鋪平道路。盡管確切的發(fā)病機制尚不清楚,但PM/DM被認為是環(huán)境因素、遺傳因素、感染和淋巴細胞紊亂等交互作用所致。近年來國外基因芯片技術研究發(fā)現(xiàn)Ⅰ型干擾素(typeⅠ interferon,IFN)誘導基因與PM/DM臨床活動性密切相關。基因芯片技術是一種能對致病基因進行大規(guī)模高通量同步性檢測的新技術,但只是初步的定性篩選手段,無法對基因及其蛋白

3、的表達進行精確的定量表達研究,為此還需要對大樣本的PM/DM患者進行Ⅰ型IFN系統(tǒng)蛋白和基因的檢測來驗證。
　　 本實驗第一部分利用ELISA法檢測PM/DM患者血清IFNα、IFNβ、IFNγ。實時定量PCR法檢測患者肌肉組織IFNα、IFNβ、干擾素α受體1(IFNαR1)、信號傳導蛋白和轉(zhuǎn)錄激活物(signal transducer and activator of transcription1,STAT1)的mRNA表達

4、水平,免疫組化技術檢測BDCA-4在患者肌肉組織中的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)PM/DM患者外周血IFNα、IFNβ蛋白表達明顯高于正常對照組(P均<0.05)；DM組明顯高于PM組(P均<0.05)。血清IFNα和IFNβ水平在伴皮疹的患者組中明顯升高(P均<0.05)；與ESR、CRP水平呈明顯正相關(P均<0.01)。12例患者經(jīng)治療后:IFNα、IFNβ水平明顯下降(P均<0.01)。PM/DM患者組肌肉的IFNα、IFNβ、STAT1基因

5、表達明顯高于正常對照組(P均<0.05)。漿樹突細胞(plasmacytoiddendritic cell,PDC)是Ⅰ型IFN主要的分泌細胞,其細胞表面特異性表達BDCA-4,研究發(fā)現(xiàn)在患者肌纖維周炎性細胞中BDCA-4表達陽性。
　　 近年來發(fā)現(xiàn)間質(zhì)性肺病(interstitial lung disease,ILD)合并感染是PM/DM的主要死亡原因之一,嚴重影響該病的預后。由于取材困難,大大影響了對PM/DM患者肺臟受累發(fā)

6、病機制的研究。我們實驗室在2005年成功建立了自身免疫性炎性肌病(experimental autoimmune myositis,EAM)的動物模型,發(fā)現(xiàn)部分模型肺臟組織同時受累,表現(xiàn)為不同程度的間質(zhì)性肺泡炎。第二部分實驗通過建立了EAM大鼠模型,結(jié)果發(fā)現(xiàn)EAM大鼠模型組的血清CK、IFNα、IFNβ明顯高于對照組(P值均<0.05)；模型組的肌肉和肺臟組織出現(xiàn)不同程度的病變,其病理評分與對照組比較明顯升高(P均<0.05)；模型組肌

7、肉中的IFNα、IFNβ、IFNαR1、STAT1、MxA、IFIT1、ISG15mRNA表達水高于對照組(P均<0.05),與血清CK值呈正相關(P均<0.05),與肌肉病理評分呈正相關(P均<0.05)；模型組肺臟中的IFNα、IFNβ、IFNαR1、STAT1、MX1mRNA表達水平高于對照組,并與肺臟病理評分呈正相關(P均<0.05)。在模型組的受累肌肉和肺臟均有BDCA-4表達,而對照組表達陰性。
　　 本研究證實PM