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文檔簡介
1、大量的實驗證明:聚羥基脂肪酸酯(PHAs,polyhydroxyalkanoates)作為組織工程的支架材料具有優(yōu)越的應用前景,間充質(zhì)干細胞(MSCs, Mesenchymal stem cells)在治療各種組織缺損和器官修復方面具有來源廣、分離易、無免疫性、增殖分裂能力強,可以分化為神經(jīng)細胞、脂肪細胞、成骨細胞等多種分化能力。本論文將由人臍帶沃頓膠質(zhì)組織(Wharton’s jelly)分離所得的臍帶間充質(zhì)干細胞(UC-MSCs,
2、umbilical cord mesenchymal stem cells)植入到PHA生物材料家族的PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架內(nèi),將UC-MSCs誘導分化為成骨細胞,通過CCK8方法檢測支架內(nèi)細胞的增殖能力,采用對生物材料物理性能的檢測確定各種材料的機械性能,采用Von Kossa和ALP染色法和RT-PCR分析法檢測UC-MSCs向成骨細胞的分化,并且比較這三種PHA生物材料支架在成骨組織工程中的應用。
3、 本論文將UC-MSCs植入PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架內(nèi)培養(yǎng)不同的天數(shù),與在24孔細胞培養(yǎng)板內(nèi)培養(yǎng)相比,支架對細胞生長有明顯的促進作用,并且,PHBVHHx對細胞生長的促進作用最強。通過對物理性能的檢測表明:在這三種PHA材料中,P3HB4HB的硬度最大,比較脆,PHBVHHx最軟,韌性最好,PHBHHx 介于兩者之間。Von Kossa和ALP染色法顯示:在PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架內(nèi)
4、,UC-MSCs能夠分化為成骨細胞,在支架內(nèi)可見黑色鈣沉淀和紅色堿性磷酸酶(alkaline phosphatase)的表達。采用RT-PCR方法檢測成骨分化特異性基因的表達也進一步證明:這三種PHA材料能夠支持UC-MSCs的成骨細胞。綜上所述,PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架具有很好的生物相容性,能夠促進UC-MSCs的生長和支持UC-MSCs向成骨細胞的分化,其中PHBVHHx支架促進UC-MSCs生長的能力最強。
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