1、目的：
　　以他克莫司(Tacrolimus FK506)為主要免疫抑制劑的肝臟、腎臟移植患者作為研究對象，探討長期使用他克莫司的移植受者紅細胞壓積波動對他克莫司血藥濃度檢測結(jié)果的影響。以及肝腎移植患者之間紅細胞壓積對他克莫司血藥濃度檢測結(jié)果影響的差異。血漿中游離狀態(tài)的血藥濃度是直接發(fā)揮藥效的濃度，目前廣泛使用的酶放大免疫法測定，是以全血作為檢測樣本，因此本次研究探討紅細胞壓積變化對他克莫司全血藥物濃度檢測結(jié)果影響程度，為臨床他克

2、莫司的檢測提供參考，以便更準確和真實的反應患者體內(nèi)他克莫司的血藥濃度。
　　方法：
　　第一，我們根據(jù)他克莫司體外相關(guān)的藥代動力學研究，分析他克莫司在人體紅細胞中分配的體外數(shù)據(jù)，利用藥代動力學方程，根據(jù)患者實際檢測的他克莫司全血藥物濃度與患者的紅細胞壓積，模擬計算出他克莫司與紅細胞的結(jié)合飽和度，同時模擬計算出他克莫司血漿濃度。建立本次實驗靈敏度高，特異性強，準確性好的酶放大免疫法測定全血中他克莫司的血藥濃度的分析方法，并對方

3、法的專一性，精密度，準確度，定量檢測范圍及線性進行考察，對檢測方法學進行評價。檢測步驟:精密吸取6個濃度的標準液、各濃度的質(zhì)控品，全血樣本200μl于1.5ml的離心管中（全血樣本需提前振動混合），再依次加入200μl的沉淀劑（甲醇）和50μl（硫酸銅）的預處理試劑，立即充分渦旋混合30s，靜置2min，10800r/min離心10min，離心結(jié)束后傾倒出所有上清液置樣品管中上機測定他克莫司全血藥物濃度，同時精密吸取低、中、高不同濃度的

4、他克莫司質(zhì)控液，儀器可自動擬合出質(zhì)控樣品和樣品的濃度結(jié)果。第二，回顧分析肝臟移植受者的給藥劑量、他克莫司全血的藥濃度與預測的他克莫司血漿的藥物濃度之間的關(guān)系。第三，回顧分析腎臟移植受者的給藥劑量、他克莫司全血的藥濃度與預測的他克莫司血漿藥物濃度之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.在數(shù)學模型模擬研究中，他克莫司的血漿濃度及全血的清除率隨紅細胞壓積變化而變化，三者間符合一定的函數(shù)關(guān)系。
　　2.用EMIT法測定質(zhì)控品Leve

5、l1（低）、Level2(中)、Level3（高）的日內(nèi)與日間精密度分別為:6.1％、3.5％、10.1％，10.6％、7.9％、9.2％;日內(nèi)與日間回收率分別是114％、95.5％、96.1％，109.3％、100.1％、103.9％;均符合《中國藥典》生物樣品檢測RSD＜15％，方法回收率在85-115％之間的規(guī)定，測定質(zhì)控品Level1（低）、Level2(中)、Level3（高）共90次，均在控制范圍內(nèi)，Level1（低）、Le

6、vel2(中)、Level3（高）質(zhì)控圖中落在x±s內(nèi)的測試點均超過69％。Level1（低）與Level3（高）質(zhì)控較好，但Level2(中)因質(zhì)控品批次間的質(zhì)量差異，質(zhì)控曲線出現(xiàn)小幅波動。
　　3.回顧分析肝臟移植受者，他克莫司在全血中的藥物濃度被控制在一定治療目標濃度范圍內(nèi)，然而，當患者肝移植術(shù)后，Hct的變化呈現(xiàn)多樣性，根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，Hct與D/CP(他克莫司的給藥劑量與血漿藥物濃度的之比)的相關(guān)性(R=-0.149，n=

7、302)要比Hct與D/CWB(他克莫司的給藥劑量與全血藥物濃度之比)的相關(guān)性(R=-0.493，n=302)差。
　　4.回顧分析腎臟移植受者，他克莫司在全血中的藥物濃度被保持在一定治療范圍內(nèi)，然而，當患者腎臟移植術(shù)后，Hct的變化呈現(xiàn)多樣性，根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，Hct與D/CP（他克莫司的給藥劑量與血漿藥物濃度的之比）的相關(guān)性(R=-0.556，n=463)要比Hct與D/CWB（他克莫司的給藥劑量與全血藥物濃度之比）的相關(guān)性(R=

8、-0.778，n=463)差。
　　結(jié)論：
　　EMIT法測定他克莫司的全血藥物濃度的專一性好，精密度高，是符合臨床血藥濃度檢測要求，實驗室建立的質(zhì)量控制標準可靠，實驗監(jiān)測結(jié)果準確。
　　對于需要長期服用抗免疫排斥反應藥物他克莫司的肝或腎移植受者來說，Hct是他克莫司藥代動力學一個非常重要的影響因素。因此在日常給予他克莫司的藥物劑量時應將Hct考慮進來，特別是在紅細胞壓積較低時。同時對于肝移植的患者尤為重要。建議肝移植