支氣管哮喘氣道平滑肌細胞線粒體膜ATP敏感鉀通道對PKC信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及細胞增殖的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   探討線粒體ATP敏感鉀通道(mitoKATP)和線粒體膜電位(Δψm)在支氣管哮喘氣道平滑肌細胞中對PKCα信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和細胞增殖的影響。
   方法:
   以SD大鼠為實驗動物,隨機將36只雄性大鼠平均分為正常組和哮喘組,以腹腔注射和霧化吸入卵白蛋白法制備大鼠哮喘模型。取大鼠氣道平滑肌細胞,分為六組進行干預(yù):A.正常對照組;B.正常+diazoxide(mitoKATP特異性開放劑)組;C.正常

2、+5-HD(mitoKATP特異性阻斷劑)組;D.哮喘對照組;E.哮喘+diazoxide組;F.哮喘+5-HD組。以激光共聚焦顯微鏡成像法檢測線粒體膜電位;western blot法檢測細胞PKCα蛋白的表達;realtime PCR法檢測細胞PKCα mRNA的表達;MTT法檢測細胞的增殖情況,及流式細胞術(shù)檢測細胞周期。
   結(jié)果:
   (1)B組中R-123熒光明顯增強,PKCα蛋白表達量增高,PKCα mRN

3、A表達量增高,細胞增殖明顯增加,與A組比較,均有p<0.05;而C組與正常對照組相比較,上述指標均無明顯變化。(2)D組與E組較A組R-123熒光明顯增強,PKCα蛋白與PKCα mRNA表達量增高,細胞增殖明顯增加(p<0.05);其中E組上述指標的增高較D組更顯著(p<0.05)。而哮喘氣道平滑肌細胞以5-HD干預(yù)24小時后,與哮喘對照組相比(即F組與D組相比),R-123熒光明顯減弱,PKCα蛋白與mRNA表達量降低,細胞增殖明顯

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