1、本文主要從以下幾部分展開論述:
　　第一部分 PDRG1基因在乳腺癌組織中的表達(dá)及意義
　　目的:檢測(cè)PDRG1基因在乳腺癌、乳腺癌旁組織及乳腺纖維腺瘤組織中的表達(dá)情況，初步探討其與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。方法:用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)50例乳腺癌、50例乳腺癌旁組織和30例乳腺纖維腺瘤組織中PDRG1的蛋白表達(dá)，并分析PDRG1蛋白表達(dá)與臨床病理特征、病理指標(biāo)之間的關(guān)系。結(jié)果:PDRG1在乳腺癌旁組織、乳腺纖維腺瘤和乳腺癌組織

2、中的陽性率分別是10.0％、13.3％和70.0％，PDRG1基因在乳腺癌中的蛋白表達(dá)明顯高于乳腺纖維腺瘤和乳腺癌旁組織中的表達(dá)(P＜0.01)，而在乳腺纖維腺瘤組織與乳腺癌旁組織中表達(dá)相比差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。PDRG1蛋白表達(dá)與患者年齡、TNM分期、T分期、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織類型這些臨床病理特征未見相關(guān)性(P＞0.05)。PDRG1蛋白表達(dá)與ER、PR、P53和Ki67表達(dá)也未見相關(guān)性(P＞0.05)，而與C-

3、erbB-2蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(P＜0.01)。結(jié)論:PDRG1在人乳腺癌組織中呈高表達(dá)，和C-erbB-2蛋白表達(dá)呈正相關(guān)，PDRG1可能與乳腺癌的發(fā)生相關(guān)。
　　第二部分 siRNA靶向沉默PDRG1基因?qū)θ橄侔┘?xì)胞增殖和凋亡的影響
　　目的:驗(yàn)證siRNA干擾PDRG1基因的沉默效應(yīng)，研究靶向沉默PDRG1基因?qū)θ橄侔┘?xì)胞增殖和凋亡的影響。方法:針對(duì)人PDRG1基因mRNA序列設(shè)計(jì)并化學(xué)方法合成3對(duì)PDRG1-siRNA

4、;通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行siRNA轉(zhuǎn)染，優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件;設(shè)定siRNA干擾組（PDRG1-siRNA）、空白對(duì)照組（僅加細(xì)胞培養(yǎng)液）、轉(zhuǎn)染試劑對(duì)照組(不加siRNA)和siRNA陰性對(duì)照組(NC-siRNA)，利用Real-time PCR和Western Blot分別檢測(cè)PDRG1-siRNA轉(zhuǎn)染前后MCF-7細(xì)胞中PDRG1基因和蛋白表達(dá)水平，篩選出一條干擾最有效的PDRG1-siRNA序列;通過該序列干擾PDRG1基因，分別用CCK

5、-8和流式細(xì)胞儀檢測(cè)干擾前后MCF-7細(xì)胞增殖和凋亡的變化。結(jié)果:當(dāng)siRNA與脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑（體積比）比例為1比1.5時(shí)其轉(zhuǎn)染效率最高(83％)，Real-time PCR、Western Blot結(jié)果顯示，PDRG1-siRNA3干擾效果最好，能有效降低PDRG1mRNA和蛋白水平。PDRG1-siRNA3干擾組與空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組比較，MCF-7細(xì)胞增殖明顯減慢(P＜0.05)，細(xì)胞凋亡率無明顯差異(P＞0.05)。結(jié)論:篩選