1、植物激素幾乎調(diào)節(jié)著植物發(fā)育的每一方面，而其在雄蕊發(fā)育中的調(diào)節(jié)作用，對于雄蕊育性顯得尤為重要。花藥發(fā)育中植物激素的合成、運輸、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)任何一步出現(xiàn)問題都將會導(dǎo)致雄性不育。TIR1蛋白作為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中的一員，它對生長素的感應(yīng)對于其下游依賴生長素信號的相關(guān)花藥發(fā)育基因的表達舉足輕重?；ㄋ幇l(fā)育的正常與否往往關(guān)系著植物的育性。對生長素相關(guān)基因在紅麻花藥發(fā)育中作用的研究，為紅麻雄性不育機理研究提供了理論依據(jù)。
　　前人通過花粉管通道法，利用

2、紅麻非全長HcPDIL5-2a基因轉(zhuǎn)化紅麻722B保持系材料，從而獲得雄性不育突變體HMS。本研究在這基礎(chǔ)上以紅麻轉(zhuǎn)非全長HcPDIL5-2a基因雄性不育系HMS和722B保持系為材料，通過高效液相測定內(nèi)源激素含量，分析HMS和722B內(nèi)源激素的變化;采用同源克隆和分子生物學(xué)方法克隆了紅麻生長素受體基因HcTIR1基因，并利用RT-qPCR的方法分析了該基因在不育系和保持系中的相對表達量;為了進一步確認(rèn)HcTIR1基因在雄性不育中的作用

3、，將HcTIR1基因構(gòu)建植物超量表達載體和干擾載體，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化煙草，驗證其基因功能。獲得的主要結(jié)果如下:
　　1.內(nèi)源激素測定結(jié)果顯示，HMS不育系中三個時期花藥的IAA、GA均低于722B，而ABA的情況卻與之相反。HMS不育系中IAA和GA含量的變化趨勢為下降，而722B中IAA含量變化也是呈下降趨勢，但其GA變化趨勢為上升。兩系的ABA含量變化趨勢一致，但HMS不育系每個時期的ABA含量明顯高于722B的相應(yīng)時期?？?/p>

4、見，非全長HcPDIL5-2a基因確實在HMS雄性不育系中對激素代謝產(chǎn)生了影響。
　　2.根據(jù)紅麻花藥轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)和生物信息學(xué)方法克隆了HcTIR1基因的cDNA和gDNA，它們的長度分別為1761bp和2726bp;HcTIR1基因有2個內(nèi)含子，它們的長度分別為688bp、277bp，將HcTIR1基因cDNA序列提交至NCBI數(shù)據(jù)庫，GenBank登陸號:KY613992;HcTIR1基因編碼586個氨基酸，是富含LRR的F-b

5、ox蛋白。
　　3.利用RT-qPCR技術(shù)分析了HcTIR1基因在根、莖、葉及花藥不同發(fā)育時期的表達情況，結(jié)果表明，HMS系和保持系722B中HcTIR1基因在根、莖、葉表達差異不顯著，而花藥不同發(fā)育時期表達差異顯著。在花藥三個時期均顯著下調(diào)，在四分體時期表達量僅為722B的0.088倍，單核期為0.116倍，雙核期為0.018倍。說明非全長HcPDIL5-2a基因影響了HcTIR1礎(chǔ)基因的表達。成功構(gòu)建了HcTIR1基因的超量表