1、目的：鎮(zhèn)肝熄風湯對高危個體進行早期干預可能可以影響缺血性腦卒中的預后。在既往研究基礎上，我們擬預先使用鎮(zhèn)肝熄風湯14日后，采用大腦中動脈線栓法制作大鼠局灶性腦缺血損傷模型，通過檢測MCAO大鼠腦組織的ET-1含量的變化、腦組織病理學改變、腦水腫程度、缺血側腦組織炎性浸潤情況，神經(jīng)細胞凋亡率變化以及相關蛋白和基因的表達等來研究其發(fā)揮作用的可能生物學基礎。 研究方法：采用線栓法制備大腦中動脈梗塞大鼠模型。 (1)評價大腦中動

2、脈梗塞性大鼠腦缺血后行為障礙，應用TTC染色、HE染色等病理技術研究鎮(zhèn)肝熄風湯對腦梗塞范圍、腦水腫程度及缺血組織病理形態(tài)、海馬CAl區(qū)神經(jīng)元密度的影響； (2)應用real-time PCR、western blot等技術研究鎮(zhèn)肝熄風湯干預對大鼠腦組織ET-1，ELISA法檢測TNF-α表達的影響，通過髓過氧化物酶活性分析鎮(zhèn)肝熄風湯干預對腦缺血部位單核細胞活性的影響； (3)采用western blot技術分析MCAO大

3、鼠缺血側腦組織AQP4與AQP9表達量的變化和鎮(zhèn)肝熄風湯對其的影響； (4)采用脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法、流式細胞術檢測大鼠腦組織細胞凋亡率，westerblot檢測凋亡效應蛋白表達，研究鎮(zhèn)肝熄風湯對大鼠局灶性腦缺血后細胞凋亡的影響。 結果：預先使用鎮(zhèn)肝熄風湯14日， (1)可明顯改善MCAO大鼠行為學障礙，減輕腦水腫程度，減少腦缺血性損傷面積，改善局灶性腦缺血引起的海馬CAl區(qū)神經(jīng)元密度降低

4、； (2)從轉錄水平上抑制缺血性損傷引起的局部組織ET-1過度表達，改善與ET-1表達相關的TNF-a含量及單核細胞活化程度變化，抑制ET-1高度表達引起的局部炎癥反應； (3)調節(jié)MCAO大鼠缺血側腦組織AQP4與AQP9蛋白表達量，改善局部組織水液代謝； (4)降低McAO大鼠Cleaved caspase 3和Cleared PARP蛋白表達量，抑制缺血性損傷引起的神經(jīng)細胞凋亡。 結論：急性局部腦缺

5、血時突然發(fā)生的臟腑病變及功能失調、繼發(fā)于臟腑病變與局部組織環(huán)境急劇改變的應激性自分泌、旁分泌因子如ET-1、TNF-a等類炎性／炎性細胞因子過度表達、局部活化的炎癥反應，以及影響絡脈正常的生理功能的物質如AQP4與AQP9等在病理狀態(tài)下的異常反應，可能共同構成了疾病急性發(fā)生過程中的風、火、痰、熱、毒的基礎。鎮(zhèn)肝熄風湯通過抑制ET-1、TNF-a表達及局部炎癥反應，調節(jié)局部水液代謝，影響caspase蛋白凋亡途徑，對抗缺血弓l起的神經(jīng)細胞