1、促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)是可以選擇性刺激造血干細(xì)胞增生分化成紅細(xì)胞的集落刺激因子。EPO的產(chǎn)生細(xì)胞主要位于腎皮質(zhì)近曲小管周?chē)拈g質(zhì)細(xì)胞或基底膜內(nèi)。慢性腎功能衰竭晚期因腎單位大部分遭破壞，EPO生成量明顯減少，同時(shí)伴有釋放缺陷，致EPO相對(duì)或絕對(duì)缺乏而導(dǎo)致’腎性貧血。促紅細(xì)胞生成素于19世紀(jì)問(wèn)世，并于80年代實(shí)現(xiàn)了基因重組促紅細(xì)胞生成素(rh-EPO)的生產(chǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于臨床。如今rh-EPO已成為治療。

2、腎性貧血的首選藥物。近年研究表明，使用rh-色PO除能較好糾正貧血外，對(duì)改善腎功衰竭患者紅細(xì)胞免疫以及細(xì)胞和體液免疫功能等方面都有明顯作用。 T淋巴細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最重要的一大細(xì)胞群，在正常機(jī)體內(nèi)各個(gè)T淋巴細(xì)胞亞群相互作用，維持著機(jī)體正常的免疫功能。輔助性T細(xì)胞在免疫應(yīng)答中作用復(fù)雜，根據(jù)其分泌細(xì)胞因子的不同，可以將其分為兩組功能性亞群，Th1型細(xì)胞因子包括IFN-γ、IL-2和TNF-α等，主要輔助細(xì)胞免疫應(yīng)答。Th2型

3、細(xì)胞因子包括IL-4、IL-5、IL-6、IL-10，主要輔助體液免疫應(yīng)答。其中TNF-a和IL-6作為常見(jiàn)的炎性細(xì)胞因子，在機(jī)體感染過(guò)程中起著重要作用。 目的 本研究通過(guò)觀(guān)察慢性腎功能衰竭長(zhǎng)期血液透析患者給予不同用法rh-EPO治療前后免疫球蛋白含量、T淋巴細(xì)胞亞群及Th1型細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α，Th2型細(xì)胞因子IL-4、IL-6、IL-10mRNA水平表達(dá)的改變，探討rh-EPO對(duì)患者體液免疫、細(xì)

4、胞免疫功能和Th1/Th2型細(xì)胞因子的影響，及對(duì)免疫紊亂狀態(tài)的改善情況。并通過(guò)對(duì)IL-6、TNF-a等炎性因子變化的研究，觀(guān)察rh-EPO用藥后是否能糾正其易感染狀況。 材料和方法 1、臨床資料：慢性腎衰竭維持性血透患者60例，隨機(jī)分成3組，每組各20例。A組：給予rh-EPO(益比奧-沈陽(yáng)三生制藥)10000U，每周一次皮下注射；B組：給予相同劑量rh-EPO，每周分2～3次皮下注射；C組：為對(duì)照組，不用rh-EPO。

5、 2、實(shí)驗(yàn)方法：三組患者分別于治療前及治療8周后采血，EDTA抗凝。采用免疫透射比濁法測(cè)定免疫球蛋白；采用APAAP酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定T淋巴細(xì)胞亞群；采用RT-PCR檢測(cè)Th1型細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α，Th2型細(xì)胞因子IL-4、IL-6、IL-10mRNA水平的表達(dá)。同時(shí)觀(guān)察3組患者治療期間貧血狀況的改善及感染發(fā)生率。 3、統(tǒng)計(jì)分析：全部結(jié)果采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果

6、 1、生化結(jié)果及貧血狀況：治療后RBC總數(shù)、Hot和Hb在A(yíng)組和B組較治療前均有明顯升高(P<0.01)，與對(duì)照組相比統(tǒng)計(jì)學(xué)存在明顯差異，但A、B兩組之間進(jìn)行比較無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而B(niǎo)UN、Scr在治療后都沒(méi)有明顯變化，與治療前和對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 2、免疫球蛋白治療前后變化：經(jīng)rH-EPO治療后，A、B兩組患者IgG改善明顯，其中A組由治療前的8.03±1.12 mg/ml升高為11.56±2.01 mg

7、/ml，而B(niǎo)組由治療前的8.14±1.35mg/ml升高為10.96±1.67mg/ml，接近正常，與對(duì)照組相比，有顯著性差異(P<0.01)。但A、B兩組之間無(wú)顯著性差異。IgA、IgM變化不大，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理無(wú)差異(P>0.05)。 3、T淋巴細(xì)胞亞群治療前后變化：rh-EPO治療后，A組CD3+由治療前的38.27±10.10％提高到49.92±10.63％；B組CD3+由治療前的38.06±11.20％提高到45.84±11

8、.20％(A組t=3.562，P<0.01；B組t=3.102，P<0.05)。A組CD4+由治療前的20.50±7.27％提高到30.52±7.63％；B組CD4+由治療前的22.60±11.38％提高到31.51±9.05％(A組t=2.870，P<0.05； B組t=2.902，P<0.05)，與對(duì)照組比較，數(shù)量明顯增加，而CD8+沒(méi)有明顯變化(P>0.05)，因而導(dǎo)致A、B兩組的CD4+/CD8+比例升高，A組由治療前的1.06

9、±0.54升高為治療后的1.57±0.53，B組由治療前的1.06±0.48升高為治療后的1.70±0.75。但A、B兩組之間無(wú)明顯差異。 4、Th1/Th2類(lèi)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平比較：經(jīng)rh-EPO治療后，A組外周血單個(gè)核細(xì)胞TNF-αmRNA相對(duì)表達(dá)密度由治療前的0.68±0.21降為0.26±0.11；B組由治療前的0.74±0.27降為0.31±0.12。A組IL-4的mRNA相對(duì)表達(dá)密度由治療前的0.36±0.18

10、降為0.11±0.04；B組由治療前的0.42±0.15降為0.13±0.07。A組IL-6的mRNA相對(duì)表達(dá)密度由治療前的0.32±0.12降為0.16±0.09；B組由治療前的0.38±0.14降為0.18±0.10(P<0.01)，與對(duì)照組比較，有顯著性差異(P<0.01)。A、B兩組之間未見(jiàn)到明顯差異。由于慢性腎衰竭維持性血透患者均呈免疫功能?chē)?yán)重低下?tīng)顟B(tài)，未檢測(cè)到IFN-γ、IL-2和IL-10 mRNA的表達(dá)。 5、r

11、h-EPO對(duì)維持性血透患者感染發(fā)生的影響：3組尿毒癥血透患者在8周治療期間的感染發(fā)生例數(shù)分別為A組15％(3例)、B組20％(4例)、C組35％(7例)， A、B兩組尿毒癥患者在EPO治療期間的感染發(fā)生例數(shù)均低于對(duì)照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示A、B兩組與對(duì)照組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(A、C組比較x<'2>=31.35，P<0.01；B、C組比較x<'2>=31.35，P<0.01)。 結(jié)論 1、rh-EPO可有效改善尿毒癥患者貧血狀

12、況。 2、rh-EPO治療可明顯提高CRF患者的IgG濃度，改善患者的體液免疫功能。 3、rh-EPO治療后CD3+T細(xì)胞亞群、CD4+T細(xì)胞亞群及CD4+/CD8+比率顯著升高，有效調(diào)節(jié)尿毒癥患者T淋巴細(xì)胞亞群免疫紊亂的狀況。 4、rh-EPO治療后Th2類(lèi)細(xì)胞因子表達(dá)降低，使Th1/Th2平衡向Th1方向轉(zhuǎn)化，有效調(diào)節(jié)Th1/Th2類(lèi)細(xì)胞因子失衡狀態(tài)；致炎因子IL-6、TNF-α表達(dá)顯著降低，抗炎作用增強(qiáng)。