1、研究背景:糖尿病認(rèn)知功能損害的機(jī)制迄今尚未完全明確，但業(yè)已證實(shí)氧化應(yīng)激與糖尿病認(rèn)知功能損害之間有很強(qiáng)的相關(guān)性。高血糖誘導(dǎo)活性氧自由基和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物過度增加，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的活性氧產(chǎn)生過多而超過自身抗氧化能力時(shí)，引起氧化應(yīng)激損害，能夠?qū)е轮悺⒌鞍踪|(zhì)、甚至DNA等細(xì)胞內(nèi)大分子的損傷，在糖尿病及其并發(fā)癥的進(jìn)程中伴有重要角色。HIF-1α是一種參與調(diào)節(jié)氧穩(wěn)態(tài)失衡的核心因子，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)氧濃度下降時(shí)HIF-1α的表達(dá)增加，能調(diào)節(jié)下游促紅細(xì)胞生成素、血管

2、內(nèi)皮生長因子等基因的表達(dá)，從而使機(jī)體細(xì)胞耐受缺氧狀態(tài)。但嚴(yán)重缺氧或HIF-1α通路的長期持續(xù)激活，則會(huì)導(dǎo)致與p53等凋亡基因有關(guān)的細(xì)胞凋亡。我們前期研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α在糖尿病大鼠海馬中高度表達(dá)，可能導(dǎo)致了認(rèn)知功能障礙的發(fā)生。NADPH氧化酶是ROS的主要來源，可以參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的正常生理活動(dòng)，但其過度表達(dá)與癡呆等神經(jīng)退行性病變的發(fā)生密切相關(guān)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，抑制NADPH氧化酶4(NOX4)的過表達(dá)，可以減輕腦缺血再灌注損傷、緩解糖尿

3、病心肌病及腎損害。有學(xué)者也指出，NOX4是調(diào)節(jié)HIF-1α參與應(yīng)對(duì)缺氧環(huán)境的一個(gè)重要靶基因。糖尿病機(jī)體PKC通路被激活，使NOX4表達(dá)增強(qiáng)，與高糖缺氧下HIF-1α的過度表達(dá)具有較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)，NOX4與HIF-1α可能協(xié)同影響著糖尿病認(rèn)知功能障礙的發(fā)生發(fā)展。因此，緩解氧化應(yīng)激、改善乏氧微環(huán)境可能在防治糖尿病認(rèn)知功能損害方面發(fā)揮重要作用。既往研究發(fā)現(xiàn)益氣補(bǔ)腎方—腦神康膠囊具有神經(jīng)保護(hù)作用，可以降血糖、清除自由基、抗脂質(zhì)過氧化，并能有效改善胰

4、島素抵抗?fàn)顟B(tài)及神經(jīng)電生理損害，但其具體作用分子機(jī)制尚不明確。
　　目的:觀察糖尿病大鼠海馬組織氧化應(yīng)激水平及NOX4、HIF-1α的表達(dá)，并探討腦神康膠囊對(duì)糖尿病認(rèn)知功能損害的保護(hù)作用機(jī)制。
　　方法:通過腹腔注射鏈脲佐菌素制作糖尿病大鼠模型，高蛋氨酸高膽固醇飼喂12周后，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、糖尿病組、中藥小劑量組、中藥大劑量組、西藥組。灌胃給藥干預(yù)治療12周后，進(jìn)行水迷宮測(cè)試及腦干聽覺誘發(fā)電位(BAEP)檢測(cè)，處死大鼠測(cè)定

5、海馬組織超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量，尼氏染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元形態(tài)，免疫組化方法檢測(cè)海馬NOX4、HIF-1α蛋白表達(dá)水平，RT-PCR檢測(cè)NOX4、HIF-1α、Bax、Bcl-2mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:糖尿病組大鼠逃避潛伏期較正常組明顯延長（P＜0.01），BAEPⅡ波及Ⅴ波潛伏期、Ⅰ-Ⅴ波峰間期明顯延遲（P＜0.01），海馬組織SOD活性降低，MDA含量明顯增加，NOX4、HIF-1α、Bax表

6、達(dá)顯著增加(P＜0.01)。與糖尿病組相比，中藥小劑量組、中藥大劑量組及西藥組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力顯著改善，逃避潛伏期縮短，在原平臺(tái)象限停留時(shí)間明顯延長，海馬SOD活性及Bcl-2表達(dá)明顯增加，MDA含量明顯降低，NOX4、HIF-1α、Bax表達(dá)顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）。而中藥大劑量組比其余治療組效果更顯著(P＜0.01或P＜0.05)。
　　結(jié)論:NOX4-ROS-HIF-1α途徑可能導(dǎo)致了糖尿病認(rèn)知功能障礙的發(fā)生發(fā)