1、靈芝多糖(Ganoderma lucidum Polysaccharide，GLP)系從靈芝[Ganodermalucidum(Leyss ex Fr．Karst.)]子實(shí)體中提取的多糖組份，易溶于水。大量文獻(xiàn)報道靈芝多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用和抗腫瘤作用，多數(shù)研究報道認(rèn)為靈芝多糖在體外沒有直接的抑制或殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，然而體內(nèi)給藥卻具有良好的抗腫瘤作用，因此，一般認(rèn)為靈芝多糖的抗腫瘤作用是通過增強(qiáng)免疫功能而介導(dǎo)的。雖然有許多學(xué)者從免疫學(xué)的

2、角度研究了靈芝多糖的抗腫瘤機(jī)制，而且取得了較好的進(jìn)展，但其確切機(jī)制仍然不是十分清楚，有待深入研究。 目的： 1．通過觀察免疫細(xì)胞數(shù)量變化與腫瘤大小的關(guān)系，探討靈芝多糖抗腫瘤作用的免疫學(xué)機(jī)制。 2．研究靈芝多糖對S180荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞核酸及其細(xì)胞周期的影響，探討其抗腫瘤作用的可能機(jī)制。 方法： 1．取荷瘤(S-180)小鼠40只隨機(jī)分為生理鹽水對照組、靈芝多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組，劑量分別為400，200

3、，100mg/kg體重，每組10只，灌胃給藥，每天一次，連續(xù)9天。采用血細(xì)胞分析儀計數(shù)血液中自細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的數(shù)量；流式細(xì)胞儀檢測T細(xì)胞亞群百分率；腫瘤稱重后做病理石蠟切片，經(jīng)HE染色，光鏡下照相，形態(tài)立體計量學(xué)方法測量腫瘤組織中淋巴細(xì)胞的體密度。 2．分別給荷S-180腹水瘤小鼠灌胃靈芝多糖(400，200，100 mg/kg體重)、生理鹽水、或皮下注射環(huán)磷酰胺(25mg/kg體重)，每天一次，連續(xù)9天。觀察腹水瘤細(xì)胞RNA、

4、DNA含量，RNA/DNA比值以及細(xì)胞周期的改變。激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)和吖啶橙(AO)熒光染色技術(shù)檢測腫瘤細(xì)胞DNA和RNA熒光強(qiáng)度。流式細(xì)胞儀和碘化丙啶(PI)熒光染色技術(shù)分析腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期。 結(jié)果： 1．靈芝多糖抑瘤率分別為37.85％(Ⅰ組)，45.67％(Ⅱ組)，17．98％(Ⅲ組)，第Ⅱ組效果最好，p<0.01；靈芝多糖組血液中自細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞總數(shù)均高于對照組，第Ⅱ組增加最多，p<0.01；給藥組C

5、D4<'+>/CD8<'+>T細(xì)胞比值明顯高于對照組，以第Ⅱ組為最高，p<0.01；腫瘤組織中淋巴細(xì)胞的體密度(％)，給藥組也高于對照組，仍以第Ⅱ組為最高，p<0.01。經(jīng)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，被檢測的各項(xiàng)免疫學(xué)指標(biāo)均與抑瘤率呈正相關(guān)趨勢。 2．與生理鹽水組比較，靈芝多糖各劑量組的RNA、DNA含量有不同程度的減少，中劑量組(200mg/kg)具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)；靈芝多糖各劑量組的RNA/DNA比值均下降(P=0.003，

6、0.000，0.008)，說明靈芝多糖減少在體腫瘤細(xì)胞RNA的含量比DNA更為明顯。環(huán)磷酰胺使腫瘤細(xì)胞的RNA和DNA含量均下降(P=0.000)，但對RNA/DNA比值沒有影響。靈芝多糖各劑量組使G0/G1期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)增加(P=0.003，0.000，0.000)，而環(huán)磷酰胺作用相反(P=0.000)。靈芝多糖對S期細(xì)胞的百分率沒有影響，而環(huán)磷酰胺使S期細(xì)胞的百分率減少(P=0.011)。靈芝多糖各劑量組使G2/M期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)下降(P