1、1、目的
　　 通過構建大鼠自體原位肝移植(AOLT)模型，比較板藍根多糖灌胃組大鼠與對照組大鼠自體原位肝移植術后早期肝臟病理改變、生化指標及TNF-α表達差異，研究板藍根多糖對大鼠自體原位肝移植模型肝臟缺血-再灌注損傷的保護作用，分析其對肝移植大鼠肝臟功能保護作用的可能機制，為進一步探索肝移植提供實驗基礎。
　　 2、方法
　　 2.1清潔級SD純系大鼠72只，雌雄不拘，隨機分為3組：自體原位肝移植模型組(AO

2、LT組n=24)；板藍根多糖+自體原位肝移植組(RIPT組n=24)；假手術組(Sham組n=24)。兩組自體原位肝移植大鼠均采用經(jīng)門靜脈灌注的70％自體肝移植模型，并加以技術改進施行大鼠自體原位肝移植手術，Sham組行開關腹及解剖肝周韌帶及血管手術，但術中不行灌肝處理。
　　 2.2比較大鼠自體原位肝移植術后48h內(nèi)的相關指標變化水平。各組大鼠均在術后1h、12h、24h及48h時間段各分別處死6只，經(jīng)下腔靜脈采血、分離血清，

3、全自動生化儀檢測ALT、AST等生化指標，ELISA法檢測血清TNF-α，切取肝中葉作為標本制備切片，在光鏡、透射電鏡下觀察肝細胞結(jié)構形態(tài)學改變、肝細胞線粒體及細胞器的損傷情況。
　　 3、結(jié)果
　　 3.1手術結(jié)束后，大鼠即刻蘇醒，翻身，并能維持有效呼吸、心跳。經(jīng)門靜脈灌注，肝臟熱缺血時間一般小于5秒，可以忽略。無肝期結(jié)束后，RIPT組肝臟復色均勻，色澤紅潤；AOLT組較RIPT組復色稍差，局部可見花斑樣改變。

4、　　 3.2分析各組肝功能測定結(jié)果，AOLT組及RIPT組術后1h血清ALT和AST即明顯升高，于術后1h、12h及24h均顯著高于Sham組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0。05)；RIPT組隨著術后時間的延長血清ALT和AST逐步回落，RIPT組血清ALT和AST在12h及24h時間點檢測值顯著低于對應時間段AOLT組檢測值，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 3.3光鏡下術后各組肝細胞的病理變化：RIPT組及AOLT組，

5、在術后1h觀察見肝細胞腫脹明顯，肝小葉結(jié)構基本正常，其中AOLT組肝細胞之間的間隙變寬，肝血竇變窄較明顯，內(nèi)有淤積的紅細胞并見血栓形成，周圍出現(xiàn)炎癥細胞浸潤；Sham組肝細胞結(jié)構正常，無炎癥細胞浸，肝組織無明顯改變。術后12h，RIPI組干細胞腫脹略重，肝組織無明顯改變；AOLT組肝細胞水腫加劇，肝血竇明顯變窄，肝小葉結(jié)構不清，內(nèi)有淤積的紅細胞和血栓，周圍有炎癥細胞浸潤。術后24h，RIPT組肝細胞腫脹稍好轉(zhuǎn)，肝血竇變寬；AOLT組，肝

6、細胞腫脹進一步加重，肝血竇繼續(xù)變窄，肝小葉結(jié)構顯示不清。
　　 3.4觀察透射電子顯微鏡下各組肝細胞超微結(jié)構可見：術后1h，RIPT組大鼠肝臟線粒體腫脹較輕，橢圓形，周圍內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構尚存；AOLT組，線粒體大小不一，明顯腫脹，呈類圓形。術后12h，RIPT組大鼠肝臟線粒體腫脹略加重，內(nèi)嵴部分斷裂，但仍有少量排列，周圍內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構尚存；AOLT組線粒體腫脹加劇，嚴重者可見線粒體嵴減少、斷裂或消失，周圍內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構破壞。術后24h，RIP

7、T組大鼠肝臟線粒體腫脹略好轉(zhuǎn)，損傷未見加劇，周圍內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構尚存；AOLT組線粒體腫脹加劇，內(nèi)有空泡樣變性，可見嵴斷裂或消失嚴重。術后48小時，RIPT組大鼠肝臟細胞基本正常，見少量核碎裂相；AOLT組見較多量核碎裂、凝固及溶解，可及凋亡小體。
　　 3.5 AOLT組及RIPT組血清TNF-α于術后1h均明顯升高，顯著高于Sham組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。RIPT組血清TNF-α各時間段始終低于AOLT組，于術后1、

8、12、24小時兩者檢測值差異顯著，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 4、結(jié)論
　　 本實驗采用自體原位肝移植模型，經(jīng)門靜脈灌肝，很好的模擬了臨床上肝臟缺血-再灌注損傷的病理生理過程，避免了免疫損傷的干擾，減少了因下游臟器的缺血-再灌注損傷而受到的影響，能夠相對獨立的反映肝臟的缺血-再灌注損傷；板藍根多糖灌胃預處理，能夠減輕自體原位肝移植模型大鼠肝臟的缺血-再灌注損傷，其可能的機制是通過調(diào)節(jié)缺血-再灌注損傷過程中單