細(xì)菌纖維素防硬膜外粘連薄膜的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、[目的](1)研究細(xì)菌纖維素(bacterial cellulose,BC)薄膜的制備方法及基本理化性質(zhì);(2)研究BC薄膜的體外生物相容性;(3)研究BC薄膜預(yù)防椎板切除術(shù)后硬膜外瘢痕粘連的效果和體內(nèi)生物相容性。
  [方法](1)使用木醋桿菌制備BC薄膜,分析其分子結(jié)構(gòu)和微觀形態(tài),測(cè)量其含水量、厚度、拉伸強(qiáng)度、斷裂伸長(zhǎng)率、彈性模量,模擬體液浸泡6月觀察體外降解情況。(2)制備不同濃度的BC薄膜浸提液,使用浸提液培養(yǎng)L929成纖

2、維細(xì)胞,評(píng)估細(xì)胞形態(tài),MTS法分析細(xì)胞增殖情況,分析BC薄膜細(xì)胞毒性。(3)選取日本大耳白兔40只,隨機(jī)分為4組,每組10只,分別為空白對(duì)照組、BC薄膜組、膨體聚四氟乙烯組(expanded polytetrafluoroethylene,ePTFE)、聚氨甲酸乙酯(polyurethane,PU)組,制備椎板切除模型,空白組不放置材料,其余3組分別使用3種材料覆蓋椎板缺損區(qū)。術(shù)后3月每組隨機(jī)抽取3只動(dòng)物行核磁共振(magnetic r

3、esonance imaging,MRI)檢查評(píng)估硬膜外瘢痕形成情況;術(shù)后1年處死動(dòng)物,行大體硬膜外瘢痕粘連等級(jí)評(píng)分,行HE染色、Masson三色染色、天狼星紅染色,鏡下觀察硬膜外瘢痕形成情況并進(jìn)行分級(jí)評(píng)估,鏡下觀察BC薄膜周?chē)装Y反應(yīng);取心臟、肝臟、腎臟組織行HE染色觀察有無(wú)毒性反應(yīng);空白對(duì)照組和BC組動(dòng)物在術(shù)前和術(shù)后抽血測(cè)量肝腎功能;選取日本大耳白兔5只,在皮下和肌肉中包埋BC薄膜,1周后取出行HE染色,觀察炎癥反應(yīng)。
  [

4、結(jié)果](1)BC薄膜由高純度纖維素構(gòu)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),平均含水量為94.5%,厚度為(0.80±0.07) mm,拉伸強(qiáng)度為(3.14±0.38) Mpa,斷裂伸長(zhǎng)率為28.81%,彈性模量為11 Mpa,模擬體液浸泡6月未見(jiàn)降解。(2)各浸提液濃度組細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析均為無(wú)毒,與對(duì)照組的細(xì)胞相對(duì)增殖率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),各組細(xì)胞數(shù)量均隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增加,組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。(3)所有動(dòng)物均順利完成手術(shù)。短期皮下、肌

5、肉包埋BC薄膜病理學(xué)觀察未見(jiàn)炎癥反應(yīng);BC組和對(duì)照組術(shù)后均有短期丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高,術(shù)后7d恢復(fù)正常,組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),兩組動(dòng)物術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)尿素氮、血肌酐水平與術(shù)前相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),兩組間同一時(shí)間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);MRI檢查可見(jiàn)對(duì)照組硬膜外瘢痕增生明顯,與硬膜粘連緊密,其余3組瘢痕與硬膜之間有一定空隙,被材料阻擋;各組肉眼瘢痕粘連等級(jí)評(píng)分中三種材料組與空白對(duì)照組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差

6、異(P<0.01,x2=24.254),三種材料組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.748,x2=0.580);病理學(xué)分析空白組硬膜外纖維化嚴(yán)重,三種材料組輕微硬膜外纖維形成,與空白組病理分級(jí)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,x2=25.545),三組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.494,x2=1.441);心臟、肝臟、腎臟組織HE染色未見(jiàn)異常。
  [結(jié)論]BC制成的防粘連薄膜具有良好的力學(xué)性能和生物相容性,預(yù)防硬膜外瘢痕粘連效果可靠。

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