1、目的:研究米非司酮(Mifepristone,MIF)、紫杉醇(TAX)及兩者合用在體外對人宮頸腺癌 Hela細胞和人宮頸鱗癌 SiHa細胞增殖影響,并探討其作用機制,以期發(fā)現(xiàn)一種通過誘導細胞凋亡來抑制宮頸癌細胞生長的新的聯(lián)合用藥,為擴大米非司酮化療增敏的用藥奠定科學的理論基礎。
　　方法:取對數(shù)生長期的人宮頸癌Hela細胞、SiHa細胞,以單藥及聯(lián)合用藥處理后,采用四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法測定細胞增殖活性;流式細胞儀(fl

2、ow cytometry, FCM)分析藥物對人宮頸癌Hela細胞、SiHa細胞的周期影響;RT-PCR法檢測用藥處理后對人宮頸癌Hela細胞、SiHa細胞中HPV E6、VEGF、COX-2 mRNA表達的變化;免疫印跡(Western blot)方法檢測用藥處理前后人宮頸癌Hela細胞、SiHa細胞的HPV E6、VEGF、COX-2蛋白表達的變化。
　　結(jié)果:1)MTT法結(jié)果顯示,發(fā)現(xiàn)不同濃度紫杉醇對 HeLa細胞、SiHa

3、細胞增殖均有抑制作用(P<0.01),具有量效和時效依賴性;MIF單藥結(jié)果顯示24h,48h對HeLa細胞溶媒組、MIF組(2.5、5μg/mL)與空白對照組比較,對 HeLa細胞增殖抑制率影響無統(tǒng)計學意義(P>0.05),當 MIF濃度大于10μg/mL時對 HeLa細胞增殖抑制率影響有統(tǒng)計學意義(P<0.05),具有量效和時效依賴性;不同濃度 MIF對 SiHa細胞具有明顯的增殖抑制作用(P<0.05);MIF聯(lián)合紫杉醇可增強其對

4、HeLa細胞、SiHa細胞的增殖抑制作用(P<0.01);2)流式細胞術(shù)結(jié)果顯示,單用及聯(lián)合用藥使 HeLa細胞、SiHa細胞 G0/G1期所占比例增加,S期比例減少,使周期主要阻滯在 G0/G1期,從而顯著抑制HeLa細胞、SiHa細胞的增殖;3)RT-PCR結(jié)果顯示,單用及聯(lián)合用藥處理HeLa細胞、SiHa細胞后使 HPV-E6、VEGF、COX-2 mRNA的表達水平下降;4) Western blot檢測顯示,單用及聯(lián)合應用均能