1、目的：研究表明，腺苷在腦缺血耐受(BIT)的形成中發(fā)揮重要作用，即腦預(yù)缺血(CIP)引起腦細(xì)胞合成和釋放腺苷增加，后者與特異性受體結(jié)合發(fā)揮對神經(jīng)元的保護作用，使之耐受損傷性缺血。但是，由于體內(nèi)存在高效的腺苷滅活機制，CIP誘導(dǎo)的腺苷釋放不一定能持續(xù)到隨后嚴(yán)重的缺血損傷。因此，與腺苷相比，在BIT誘導(dǎo)過程中腺苷受體(AR)的數(shù)量增多和活性增強可能發(fā)揮更重要的作用。應(yīng)用放射性配基法證實，CIP確實可使腺苷受體數(shù)量增多和親和力增強，并可持續(xù)到

2、損傷性缺血后1-7d，與CIP誘導(dǎo)和維持的缺血耐受時間相吻合；并通過免疫組化證實，CIP引起的海馬錐體神經(jīng)元上表達(dá)增多的腺苷受體為A1亞型。為進一步證實腺苷Al受體表達(dá)上調(diào)在腦缺血耐受誘導(dǎo)中的作用，本應(yīng)用腺苷Al受體反義寡聚脫氧核苷酸(As-ODN)阻斷海馬腺苷Al受體表達(dá)的上調(diào)，觀察其對CIP腦保護作用的影響。 方法：采用四血管閉塞法(4VO)制造大鼠全腦缺血模型。42只永久凝閉雙側(cè)椎動脈的Wistar大鼠分為以下8組進行實驗

3、： 1.Sham組：只暴露雙側(cè)頸總動脈，不阻斷血流； 2.單純預(yù)缺血組(CIP組)：夾閉雙頸總動脈3min； 3.損傷性缺血組：夾閉雙頸總動脈8min； 4.CIP+損傷性缺血組：夾閉雙頸總動脈3min作為CIP，再灌注2d后再夾閉8min； 5.雙蒸水+CIP+損傷性缺血組：于CIP前12h和后12h及36h右側(cè)腦室注射雙蒸水5μl，其它步驟同CIP+損傷性缺血組； 6.單純ARA1As

4、-ODN組：暴露雙側(cè)頸總動脈前12h和后12h及36h右側(cè)腦室注射 ARA1As-ODN20nmol/5μl，其余步驟同Sham組； 7.ARA1-As-ODN+CIP組：夾閉雙頸總動脈前12h和后12h及36h右側(cè)腦室注射ARA1As-ODN20 nmol/5μl，其余步驟同CIP組； 8.ARA1As-ODN+CIP+損傷性缺血組：第一次夾閉雙頸總動脈前12h和后12h及36h右側(cè)腦室注射ARA1As-ODN，其

5、余步驟同 CIP+損傷性缺血組。ARA1As-ODN的劑量分為10nmol/5μl和20nmol/5μl。 所有大鼠在術(shù)后或末次全腦缺血再灌后飼養(yǎng)7d，斷頭取腦，硫堇染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察背側(cè)海馬組織形態(tài)并對其組織學(xué)改變進行分級(0級：無神經(jīng)元死亡；1級：散在的神經(jīng)元死亡；2級：成片的神經(jīng)元死亡；3級：幾乎全部的神經(jīng)元死亡)，取雙側(cè)平均等級作為統(tǒng)計值。高倍鏡下計數(shù)海馬CA1區(qū)每1 mm區(qū)段內(nèi)細(xì)胞膜完整、胞核飽滿、核仁清晰的錐