1、草魚是我國(guó)淡水魚類養(yǎng)殖中最大宗魚類品種，近年來(lái)，隨著追求高產(chǎn)的草魚養(yǎng)殖池塘投放密度越來(lái)越高，導(dǎo)致水質(zhì)環(huán)境惡化和病害加劇。研究池塘養(yǎng)殖水體的微生物組組成結(jié)構(gòu)，能促進(jìn)淡水魚類健康養(yǎng)殖。本研究對(duì)湖南望城喬口草魚池塘暴發(fā)病與健康養(yǎng)殖水體微生物組進(jìn)行了比較分析，對(duì)暴發(fā)病魚池病魚的疾病病原進(jìn)行了分離鑒定及其拮抗菌篩選研究。
　　1.精養(yǎng)草魚池塘水體的微生物組結(jié)構(gòu)分析。采用Illumina Hiseq高通量測(cè)序技術(shù)和生物信息學(xué)技術(shù)，分析比較了精

2、養(yǎng)草魚魚塘患病和健康養(yǎng)殖水體的微生物組結(jié)構(gòu)。對(duì)微生物宏基因組測(cè)序數(shù)據(jù)分析，結(jié)果表明不同水體的樣品菌群共鑒定到38門、70綱、133目、269科、423屬，暴發(fā)病和健康養(yǎng)殖水體中細(xì)菌群落的α-多樣性存在差異，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析沒(méi)有達(dá)到顯著性水平，主坐標(biāo)分析與樣本熱圖聚類分析表明細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)明顯不同。CCA分析表明，COD對(duì)水體菌群的分布有著顯著影響。
　　2.草魚病原新菌株的分離鑒定。從暴發(fā)病魚池的患病草魚體內(nèi)分離純化出一批維氏氣單胞菌疑

3、似菌株，選取一株優(yōu)勢(shì)菌株進(jìn)行鑒定。結(jié)合16S rDNA序列分析和生理生化特性，鑒定為維氏氣單胞菌的新菌株，命名為AvX005（GenBank登錄號(hào):KU641161）。該菌進(jìn)行回復(fù)感染試驗(yàn)?zāi)苁共蒴~強(qiáng)致病，并研究了其藥敏特性和生長(zhǎng)特性。
　　3.拮抗菌的篩選及其活性物質(zhì)分析。針對(duì)病原維氏氣單胞菌AvX005新菌株，經(jīng)廣泛分離篩選出解淀粉芽胞桿菌，研究了該菌株對(duì)魚類病原菌具有廣譜性拮抗作用，發(fā)現(xiàn)對(duì)氣單胞菌屬的抑制效果最好。經(jīng)共凝集率測(cè)

4、定，解淀粉芽胞桿菌和維氏氣單胞菌共凝集率達(dá)到36.98％，拮抗菌動(dòng)物保護(hù)力試驗(yàn)測(cè)定，解淀粉芽胞桿菌對(duì)草魚的保護(hù)率達(dá)到80％。對(duì)解淀粉芽胞桿菌的抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行了理化性質(zhì)研究，表明該抑菌活性物具有熱穩(wěn)定性、耐酸、不耐強(qiáng)堿、對(duì)蛋白酶不敏感，能被有機(jī)溶劑萃取、酸沉淀，可推測(cè)該活性成分為非蛋白類物質(zhì)。
　　4.拮抗菌的抑菌活性物質(zhì)分子質(zhì)譜鑒定。發(fā)酵培養(yǎng)解淀粉芽胞桿菌，進(jìn)行發(fā)酵液的活性物質(zhì)提取，經(jīng)UHPLC分離純化和質(zhì)譜儀鑒定，發(fā)現(xiàn)該活性物