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![黏著斑激酶對高轉(zhuǎn)移性腺樣囊性癌細(xì)胞生物學(xué)特性影響的初步研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/d933d518-5a4c-4904-910a-144095948491/d933d518-5a4c-4904-910a-1440959484911.gif)
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文檔簡介
1、腺樣囊性癌是口腔頜面部常見的惡性腫瘤,其臨床生物學(xué)特征之一就是易發(fā)生轉(zhuǎn)移,這是其預(yù)后欠佳的重要原因,而對其轉(zhuǎn)移機(jī)制知之甚少。目前已發(fā)現(xiàn),細(xì)胞內(nèi)信號分子FAK可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的擴(kuò)散、遷移、凋亡和存活等多種功能。有關(guān)FAK在有獨特生物學(xué)行為的腺樣囊性癌中的表達(dá)是否具有與其它腫瘤相同或相似的情況是值得關(guān)注的,但迄今國內(nèi)外尚未見FAK與腺樣囊性癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Acc-M的生長、體外侵襲能力和抗凋亡等生物學(xué)行為關(guān)系的研究報道。目的:通過對體外培養(yǎng)的腺樣
2、囊性癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Ace-M采用FAK反義寡核苷酸的轉(zhuǎn)染抑制FAK的表達(dá)的方法,探討FAK與高轉(zhuǎn)移性腺樣囊性癌細(xì)胞的生物學(xué)特性的關(guān)系及其作用機(jī)制。材料與方法:利用脂質(zhì)體Lipofectamine2000介導(dǎo)的FAK寡核苷酸對Acc-M細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,將轉(zhuǎn)染的癌細(xì)胞應(yīng)用MTT法檢測,觀察不同組Acc-M細(xì)胞的生長情況;使用RT-PCR檢測Acc—M細(xì)胞株中FAK的表達(dá),并結(jié)合免疫熒光顯微鏡觀察技術(shù)分析ASODN、SODN及對照組的不同表現(xiàn)分
3、析;Transwell小室技術(shù),分析其侵襲能力;Tunel及FCM的方法檢測細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果:本研究在國內(nèi)外首次觀察到:(1)Ace—M細(xì)胞中存在粘著斑激酶的表達(dá),主要定位于細(xì)胞漿。(2)本實驗設(shè)計的反義寡核苷酸可以在在mRNA和蛋白水平上顯著抑制FAK的表達(dá)(P<0.05)。(3)FAK的抑制對Ace-M細(xì)胞的生長和增殖有明顯的抑制作用。反義組腫瘤細(xì)胞的凋亡明顯增強(qiáng)與S。DN組、對照組則基本相似,幾乎無改變。(4)ASOD
4、N轉(zhuǎn)染組Acc-M細(xì)胞的黏附率和侵襲能力明顯降低。結(jié)論: (1)粘著斑激酶對Acc-M細(xì)胞增殖有明顯的促進(jìn)作用,并能抑制腫瘤細(xì)胞凋亡,并可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲性,可認(rèn)為FAK是腺樣囊性癌侵襲轉(zhuǎn)移及抗失巢凋亡的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的重要信號分子(2)脂質(zhì)體Lipofectamine2000介導(dǎo)的FAK ASODN的轉(zhuǎn)染對Acc-M細(xì)胞的封閉效果明顯,可達(dá)到對FAK的特定的抑制,是一種簡便實用的研究方法。 綜上所述,腺樣囊性癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Ac
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