shRNA干擾人增生前列腺平滑肌細胞PDE5A3基因表達治療BPH-LUTs的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
　　應(yīng)用RNA干擾技術(shù)抑制PDE5A3基因在人增生前列腺平滑肌細胞中的表達，為臨床應(yīng)用RNA干擾技術(shù)治療BPH/LUTs提供重要的理論依據(jù)。
　　方法:
　　制備4個靶向人PDE5A3基因的小發(fā)夾RNA(shRNA)表達質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染人增生前列腺平滑肌細胞48h后，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-pCR)及Western blot檢測PDE5A3基因和cGMP的表達抑制效果。
　　結(jié)果:
　　將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

2、人增生前列腺平滑肌細胞后，各組轉(zhuǎn)染效率均超過90％，并成功誘導(dǎo)了RNA干擾。與空白對照和陰性對照組相比，4組shRNA均可在mRNA和蛋白水平降低PDE5A3的表達(P＜0.05)，其中siPDE5A3-2抑制效果最為明顯:PDE5A3基因在空白對照、陰性對照和siPDE5A3-2組mRNA水平表達分別為1.05±0.06、0.98±0.06和0.41±0.02;在蛋白水平表達分別為0.49±0.04、0.46±0.04和0.18±0.

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