1、本課題擬探討小腸RNA對受60Coγ線照射小鼠腸道損傷修復過程中腸道免疫的變化及其機制，為腸道損傷的治療提供理論和實驗依據，提高急性放射病治療水平。 研究方法：BALB/c小鼠于實驗前一天按完全隨機法分為正常對照組、照射對照組和小腸RNA組，設照后6h、1d、3d、5d共4個時間點，用60Coγ線進行腹部一次照射，劑量率為(228.03～249.12)cGy/min，劑量為1150cGy。于照后1～3h采用局部腸腔擴張注入法給小

2、鼠空腸腸腔內注入小腸RNA，照射對照組小鼠只在腸腔內注入等量無菌生理鹽水，于照后不同時間點麻醉解剖小鼠，觀察以下指標： (1)光鏡觀察小鼠空腸形態(tài)結構的變化；(2)電鏡(透射電鏡和掃描電鏡)觀察小鼠空腸超微結構的變化；(3)孚爾根染色法計數(shù)小鼠空腸腸腺存活率的變化；(4)厭氧細菌培養(yǎng)法觀察小鼠腸系膜淋巴結細菌移位的變化；(5)采用基質顯色法檢測小鼠腹主動脈血中內毒素含量的變化；(6)以免疫濁度檢測法檢測小鼠腸黏液中免疫球蛋白的含

3、量的變化；(7)流式細胞術測定小鼠腸系膜淋巴結淋巴細胞周期的變化；(8)采用免疫組化方法檢測小鼠腸系膜淋巴結淋巴細胞P53蛋白表達的變化；(9)TUNEL法檢測小鼠腸系膜淋巴結淋巴細胞凋亡率的變化；(10)化學發(fā)光分析法檢測小鼠腸系膜淋巴結淋巴細胞化學發(fā)光強度的變化。 研究結果： 1.非特異性免疫功能的變化①組織形態(tài)的變化：照后1d，照射對照組腸腺存活率為60.6％，電鏡見除腸腺上皮細胞有輕度空泡化外，其它細胞器沒有顯著

4、變化。至照后3d，電鏡下腸腺上皮細胞出現(xiàn)細胞變性，核膜腔擴張，異染色質增多，核仁濃縮，腸腺存活率降低了65.8％(P＜0.01)，光鏡下可見較少殘存腸腺，腸腺內細胞數(shù)目少，空腸絨毛斷裂、粘連，間質腫脹明顯。照后5d，腸腺存活率有所回升，但細胞超微結構恢復較慢，電鏡示腸腺上皮細胞微絨毛腫脹，排列紊亂，線粒體空泡化，嵴腫脹；注入小腸RNA后，小鼠空腸的腸腺存活率在各時間點均比照射對照組升高近20％(P＜0.01)。電鏡示照后1d腸腺上皮細胞

5、微絨毛整齊，細胞連接完整，線粒體、內質網基本正常。照后3～5d也僅出現(xiàn)線粒體輕度腫脹和內質網輕度擴張，絨毛排列較照射對照組整齊、規(guī)則，未見明顯縮短，較粗大，形狀不一致，絨毛萎縮、塌陷少見；②血中內毒素含量的變化：照射對照組在照后1d即顯著高于正常對照組(P＜0.05)，照后3d和5d持續(xù)升高。小腸RNA組小鼠血漿內毒素含量在照后3d和5d明顯低于照射對照組(P＜0.01)；③腸系膜淋巴結細菌移位率的變化：照射對照組隨照后時間的延長持續(xù)升

6、高(P＜0.01)，而小腸RNA組腸系膜淋巴結細菌移位率于照后5d明顯低于照射對照組(P＜0.05)。 2.腸黏液中免疫球蛋白含量的變化照后1、3、5d照射對照組和小腸RNA組小鼠腸黏液中免疫球蛋白sIgA和sIgG含量均顯著下降(P＜0.01)，且小腸RNA組明顯高于照射對照組(P＜0.01)；在照后3d處于最低值時，小腸RNA組sIgG含量與照射對照組無顯著差異，至照后5d小腸RNA組sIgG含量有所回升(P＜0.01)。

7、 3.淋巴細胞生物學特性的變化①腸系膜淋巴結淋巴細胞G1期細胞百分率在照后6h開始增高，照后1d升到最高(P＜0.01)，S期細胞百分率呈持續(xù)性降低，至照后3d降至最低(P＜0.01)，G2期細胞百分率照后3d明顯升高(P＜0.01)。小腸RNA作用后，與照射對照組相比，腸系膜淋巴結淋巴細胞G1期細胞百分率予照后3d顯著降低(P＜0.01)，G2期細胞百分率也降低，S期細胞百分率至照后3d顯著升高(P＜0.01)；②腸系膜淋巴結淋

8、巴細胞凋亡率于照后6h明顯升高，照后1d升到最高(P＜0.01)，照后3d有所下降。小腸RNA作用后，與照射對照組相比，凋亡率顯著降低(P＜0.01)；③腸系膜淋巴結淋巴細胞P53蛋白的表達在照后6h顯著升高，照后1d升到最高(P＜＜0.01)，照后3d有所下降。小腸RNA作用后，與照射對照組相比，P53蛋白的表達顯著降低(P＜0.01)；④小腸RNA的抗脂質過氧化作用：照射后，照射對照組腸系膜淋巴結淋巴細胞化學發(fā)光強度呈持續(xù)性增高，照

9、后3d升至最高(P＜0.01)。小腸RNA組腸系膜淋巴結淋巴細胞化學發(fā)光強度從照后6h起一直低于照射對照組，至照后3d明顯低于照射對照組(P＜0.01)。 研究結論：本實驗條件下：①電離輻射可引起小鼠腸道非特異性免疫、體液免疫功能的降低，以及與細胞免疫相關的淋巴細胞生物學特性的改變，且具有一定的時程特性；②小腸RNA作用后，可通過調控細胞周期、減少自由基生成、調控P53蛋白表達降低細胞凋亡來增強sIgA、sIgG的分泌，促進腸道