1、基因載體是基因治療的關(guān)鍵，病毒性基因載體在臨床應(yīng)用上暴露出一系列安全問(wèn)題，非病毒性載體的研究成為當(dāng)務(wù)之急。殼聚糖是天然甲殼素的脫乙酰產(chǎn)物，具有優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性，無(wú)免疫原性，能與DNA形成聚電解質(zhì)復(fù)合物，其復(fù)合保護(hù)DNA的能力強(qiáng)，成為當(dāng)今最具潛力的非病毒性基因載體之一。 量子點(diǎn)(QDs)熒光明亮、穩(wěn)定，激發(fā)光譜寬，發(fā)射光譜窄，且發(fā)射波長(zhǎng)可通過(guò)改變其粒徑大小和組成的材料來(lái)調(diào)控，QDs的研究已成為一門(mén)新興的交叉科學(xué)，尤其

2、是水溶性QDs作生物熒光標(biāo)記物的研究是目前最有吸引力的研究領(lǐng)域之一。 本論文首先概述了殼聚糖及其改性衍生物作基因載體的最新研究進(jìn)展，同時(shí)綜述了水溶性QDs的制備方法及應(yīng)用研究進(jìn)展，特別是它在生物、醫(yī)學(xué)中作熒光探針的最新研究。 葉酸(FA)是一種B族維生素，可特異性地與細(xì)胞表面的葉酸受體作用形成復(fù)合物，通過(guò)受體介導(dǎo)內(nèi)吞被細(xì)胞吸收且順利到達(dá)細(xì)胞核。葉酸受體可被許多腫瘤細(xì)胞超量表達(dá)，F(xiàn)A已被當(dāng)作抗癌藥物的靶向分子而受到廣泛重視

3、。因此，將FA接枝到殼聚糖上，可使負(fù)載DNA后的殼聚糖具有良好的靶向性。 聚乙二醇(PEG)無(wú)毒，有良好的水溶性和生物相容性，已廣泛用于提高材料的生物相容性和半衰期。將PEG共價(jià)連接到殼聚糖上，可提高殼聚糖載體的水溶性及穩(wěn)定性，延長(zhǎng)殼聚糖/DNA復(fù)合物在血漿中的循環(huán)時(shí)間，提高其基因轉(zhuǎn)染效率。 本研究將FA和PEG接枝到四種不同分子量的殼聚糖上，獲得了一系列改性的殼聚糖接枝共聚物。用FTIR、1HNMR、UV-Vis、DS

4、C和TEM對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了表征，結(jié)果表明，F(xiàn)A和PEG被成功地接枝到殼聚糖上。 同時(shí)，以3-巰基丙酸為穩(wěn)定劑，制備了水溶性碲化鎘(CdTe)QDs，通過(guò)UV-Vis光譜和熒光光譜考察了制備條件對(duì)QDs熒光性能的影響，在最佳條件下制備了穩(wěn)定性好、熒光強(qiáng)度高的水溶性CdTeQDs。 以高熒光強(qiáng)度和高穩(wěn)定性的CdTeQDs標(biāo)記殼聚糖及FA和PEG改性的殼聚糖，探討它們的相互作用機(jī)理發(fā)現(xiàn)，殼聚糖及改性殼聚糖都能與QDs通過(guò)靜電作用自

5、組裝，形成穩(wěn)定的復(fù)合物，且復(fù)合物的熒光強(qiáng)度相對(duì)純QDs均明顯增強(qiáng)。測(cè)定二者最低相互作用濃度發(fā)現(xiàn)，對(duì)于原始?xì)ぞ厶?，?dāng)殼聚糖與QDs的體積比為0.003時(shí)，熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值；而對(duì)于FA和PEG改性的殼聚糖，當(dāng)殼聚糖與QDs的體積比為0.00375～0.004時(shí)，熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值。殼聚糖及改性殼聚糖與QDs通過(guò)靜電作用形成核，PEG包裹在其外面，可看到明顯的核/殼結(jié)構(gòu)。殼聚糖/QDs復(fù)合物大部分呈球形，有少量橢球形，大小為200-300n