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![胚胎發(fā)育相關(guān)基因—EDAG的誘導(dǎo)表達及蛋白純化.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/6c088a9b-bca6-424d-95af-8910ea453c37/6c088a9b-bca6-424d-95af-8910ea453c371.gif)
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1、胚胎發(fā)育相關(guān)基因(EDAG)是新近發(fā)現(xiàn)的造血相關(guān)基因,該基因定位于染色體9q22,是從4月齡人胚胎組織與成年肝組織的差異基因ETS庫中分離得到的。EDAG基因在人體內(nèi)的表達具有時空依賴性:在造血活躍的組織如胎肝、成人骨髓中高表達,同時也高表達于CD34+細胞及人白血病細胞系K562中。研究表明EDAG具有惡性轉(zhuǎn)化活性,與維持細胞的未分化狀態(tài)有關(guān)。最近的轉(zhuǎn)基因小鼠研究表明,在小鼠造血細胞中過表達EDAG可導(dǎo)致造血干細胞增殖分化紊亂。突出表
2、現(xiàn)在髓系造血增強,淋巴系造血抑制,并出現(xiàn)典型的髓系增生綜合癥,提示EDAG是一種參與造血組織發(fā)育與分化調(diào)控的重要基因。 迄今為止,EDAG調(diào)控造血細胞增殖、分化及凋亡的分子機制尚不明確。鑒于EDAG是一種新發(fā)現(xiàn)的基因,目前既無商品化的蛋白亦無抗體用于其蛋白水平的研究。成功的構(gòu)建了帶有His標簽的pET22b-EDAG及pET28a-EDAG融合表達載體,并在大腸桿菌BL21(DE3)中誘導(dǎo)出蛋白的表達。同時通過反復(fù)的摸索確定出適
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