1、旦失學(xué)。學(xué)校代碼10246學(xué)號031106168博士學(xué)位論文乳腺癌血管／淋巴管新生與HER_2相關(guān)性及預(yù)后意義的研究院專姓系：業(yè)：名：指導(dǎo)教師：腫瘤醫(yī)院腫瘤學(xué)張瑰紅施達(dá)仁教授完成日期：!Q墮堡蘭旦!!旦復(fù)口大學(xué)攻讀博一學(xué)位研究生畢業(yè)論文中文摘要乳腺癌血管／淋巴管新生與HER2相關(guān)性及預(yù)后意義的研究中文摘要目的：研究血管／淋巴管新生與HER2基因的相互關(guān)系及在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用和對乳腺癌預(yù)后的影響，以期探討HER2過表達(dá)患者預(yù)后差的分

2、子機(jī)制，為乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后評估提供新的分子指標(biāo)，為HER2過表達(dá)患者的臨床治療提供新的思路和理論依據(jù)。方法：(1)選取兩株HER一2表達(dá)水平不同的乳腺癌細(xì)胞株(sKBR3、MDAMB一231)，用Herceptin藥物干預(yù)阻斷HER一2蛋白功能，采用TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Realtimequantitativereversetranscriptjonpolvmerasechainreaction，Realti

3、meqRTPcR)(相對定量法)和免疫組化法(hnmunohistochemistry，IHC)檢測Herceptin阻斷前后ⅦGFA，一C，一DmRNA及細(xì)胞爬片中三因子蛋白表達(dá)水平。(2)收集1993～1996年61例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌和29例乳腺良性病變新鮮標(biāo)本，采用realtimeqRTPCR(絕對定量法)檢測ⅦGF—A，c，一DmRNA表達(dá)水平，分析這三種因子mRNA表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)及預(yù)后問關(guān)系。(3)收集1992～19

4、96年有隨訪資料的160例乳腺癌石蠟包埋組織，通過免疫組化方法檢測血管／淋巴管新生相關(guān)指標(biāo)：ⅦGF—A—C，一D蛋白表達(dá)，并用FⅧ、podopIanin抗體分別標(biāo)記微血管、微淋巴管內(nèi)皮，計(jì)數(shù)微血管密度(microvesseldensjty，MVD)和淋巴管密度(1ymphaticvesseldensity，L、7D)，并觀察腫瘤組織中微血管侵犯(microvesselinvasion，MvI)和淋巴管侵犯(1ymphaticvessel

5、invasion，IⅣ1)情況，將以上指標(biāo)與患者的臨床病理參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。(4)顯色原位雜交法(chromogenicinsituhybrjdization，cIsH)和免疫組化法分別檢測乳腺癌組織中HER2基岡和蛋白表達(dá)狀況，分析其與乳腺癌血管／淋巴管新生相關(guān)指標(biāo)問關(guān)系，采用lo皿stic回歸模型將所有指標(biāo)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行多因素分析，并同時(shí)進(jìn)行單因素和多因素生存分析(cox風(fēng)險(xiǎn)比例模型)。結(jié)果：(1)Herceptin阻斷后sKBR

6、一3細(xì)胞ⅦGFA，c，D基因mRNA含量是阻斷前的0247、O519、0930倍。Hercepcin阻斷前sKBR一3細(xì)胞vEGFA，c免疫組化染色為強(qiáng)陽性，vEGFD為弱陽性表達(dá)；阻斷后vEGFA，C降低為中度陽性表達(dá)，ⅦGFD無明顯改變?nèi)詾槿蹶栃员磉_(dá)。Herceptin阻斷后對照組MDAMB一231細(xì)胞vEGFAC，DmRNA及蛋自表達(dá)均無明顯改變。(2)人乳腺癌VEGF—A，一cmRNA表達(dá)量(419，429)分別高于乳腺良性病變