1、2∞6屆研究生碩士學位論文Y896178學校代碼：1舵69學號：YS03261嘶2纂褒蹄筋麓擎通過瑚悄干擾技術抑制人非小細胞肺癌血管內皮生長因子基因表達的研究院系：生盒掛堂堂院專業(yè)：：壘塑焦堂皇筮王生塑堂方向：盆i盎痤堂研究生：矗量選指導老師：童堊副麴援垡昱夔援2∞6年5月完成通過RNA干擾技術抑制人非小細胞肺癌血管內皮生長因子基因表達的研究院系：生金科堂堂菹專業(yè)：生塑焦堂皇筮王生塑生方向：盆王魚逛堂研究生：直亟越指導老師：童王副麴援垡

2、星熬援摘要肺癌是嚴重危害生命的惡性腫瘤，盡管目前的醫(yī)療水平已經有了很大的提高，但是肺癌的治愈率仍然低于10％。腫瘤的侵襲和轉移是其最本質的生物學特征，也是導致治療失敗和死亡的根本原因。血管新生是腫瘤生長和轉移的先決條件。因此，抑制腫瘤血管新生，切斷腫瘤生長和轉移的所依賴的“命脈”已經成為當前腫瘤治療的一個重要的策略。血管內皮生長因子(Vascularendothelialgrowtllfactor，VEGF)是生物體內調控血管生長的一個

3、主要的調控因子。很多研究表明，在肺癌組織中血管生長因子(VEGF)的表達直接影響著肺癌腫瘤血管的生長和原發(fā)病的生長與浸潤。所以，通過抑制肺癌腫瘤細胞中ⅦGF基因的表達，有可能起到抑制肺癌組織的生長和遷移。因此，在本課題的研究中，我們選擇VEGF作為目的基因，嘗試通過PCR擴增產生siRNA表達框的方法表達sjRNA分子，利用siRNA分子抑制vEGF在非小細胞肺癌細胞系A549和本課題組構建的荷瘤裸鼠腫瘤組織中的表達，從而為肺癌基因治療

4、提供新的研究思路和方法。在腫瘤基因治療的研究中，基因的傳遞載體是其中的一個重要組成部分。目前大多數采用的病毒載體和非病毒載體在使用中都存在著諸多問題。在本謀題的研究過程中，我們采用日本NDT公司研制的非病毒陽離子聚合載體CvtoPurecnln作為外源基因的傳遞載體。在體外細胞轉染實驗中，我們通過不斷優(yōu)化轉染條件，使其在體外塒人非小細胞肺癌細胞系A549細胞的轉染效率達到40％。接蓿，我們以vEGF基因編碼區(qū)為靶點，設計相應的siRNA