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文檔簡介
1、目的:通過復(fù)制糖尿病動物(大鼠)模型,觀察不同病程紅細胞聚集指數(shù)、低切變率全血黏度值及血脂的動態(tài)變化,探討紅細胞聚集性與血脂之間的內(nèi)在聯(lián)系,為臨床糖尿病并發(fā)癥的早期防治提供實驗依據(jù)。 方法:選擇清潔級7周齡Wistar大鼠120只,雌雄各半,,體重180-220g,適應(yīng)性喂養(yǎng)兩周后將大鼠按隨機數(shù)字表法分為實驗組(TRI)和對照組(CON)。實驗組70只,雌雄各半,對照組50只,雌雄各半,實驗組喂以高脂飼料,對照組喂以普通飼料(基
2、礎(chǔ)飼料)。兩個月后將鏈脲佐菌素(STZ)用0.1mol/L(PH4.4)的檸檬酸緩沖液配成5mg/ml的溶液(STZ均要求現(xiàn)用現(xiàn)配),實驗組大鼠按30mg/kg體重的劑量一次性腹腔內(nèi)注射STZ,對照組大鼠腹腔內(nèi)注射等體積的檸檬酸緩沖液。一周后所有大鼠做OGTT:50%葡萄糖2g/kg灌胃,以空腹血糖大于7.0mmol/l和2小時血糖大于11.1mmol/l作為成摸標準。實驗組大鼠共有61只造模成功,成模率87.1%,。從實驗組選取空腹血
3、糖水平較高的50只大鼠,雌雄各半,作為糖尿病組(DIA),對照組50只大鼠作為正常組。采用隨機數(shù)字表隨機將正常組和糖尿病組各分為0周、4周、8周、12周、16周5組,正常組每組10只,糖尿病組每組10只(均為雌雄各半),分別于以上時段空腹取血測定觀測值。正常組喂普通飼料,糖尿病組則繼續(xù)喂高脂飼料。 于實驗第0、4、8、12、16周分別對相應(yīng)組大鼠采血測各觀測指標。實驗室溫度控制于24-26℃,濕度為45-50%,待測大鼠禁食10
4、-12小時,1%水合氯醛腹腔注射麻醉(0.3-0.5mg/100g),待麻醉成功后仰臥固定于操作臺上,腹正中切口,暴露下腔靜脈,近心端結(jié)扎,遠心端置結(jié)扎線備用。5號針頭10ml開腹下腔靜脈取血7ml,5ml放入肝素抗凝管交專人立即測血液流變學(xué)指標,即紅細胞聚集指數(shù)和低切全血黏度值;2ml室溫下自然凝固,1500轉(zhuǎn)/分離心10分鐘后,分離血清,置于-80℃超低溫冰箱保存,待標本收集完全后同批采用全自動血液生化儀測定血脂四項指標即甘油三酯(
5、TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。采血后結(jié)扎下腔靜脈遠心端。所有數(shù)據(jù)輸入SAS軟件包進行統(tǒng)計,計量資料用均數(shù)±標準差表示,多組間的比較采用完全隨機設(shè)計的單因素方差分析和Q檢驗,兩組間的比較采用t檢驗,兩變量間線性關(guān)系采用直線相關(guān)分析,多變量間線性關(guān)系采用多元回歸分析。a定為0.05,P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論:本實驗表明2型糖尿病大鼠的紅細胞聚集性與血脂有著明確
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