雌激素對青春期大鼠Sertoli細胞及血-睪屏障的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗旨在通過體內、體外兩種途徑給予青春期大鼠外源性雌激素,初步探討在Sertoli細胞分化和成熟階段,雌激素對Sertoli細胞FasL表達以及血-睪屏障的影響,進一步討論影響血-睪屏障的相關因素及其可能機制。 方法:(1)Sertoli細胞FasL的表達:①在培養(yǎng)液中加入雌二醇(濃度4×10-6M),分別在Sertoli細胞培養(yǎng)24小時、48小時,用間接免疫熒光方法檢測Sertoli細胞 FasL表達的變化;②新生SD

2、大鼠(出生=第0天),自出生第二天始隔日皮下注射二乙烯雌酚(DES),濃度10 mg/20ml,至第十二天為止,與母鼠共同喂養(yǎng)至第18天和第25天兩個時間點取材。應用間接免疫熒光方法檢測Sertoli細胞 FasL表達的變化。(2)新生SD大鼠自出生第二天始隔日皮下注射DES,與母鼠共同喂養(yǎng)至第18天和第25天取出雙側睪丸,切成1mm3小塊,置入3% 硝酸鑭-戊二醛-二甲砷酸鈉緩沖液中前固定,利用重金屬鑭不能穿越正常血-睪屏障的特點,運

3、用睪丸組織硝酸鑭塊染法在電鏡下觀察血-睪屏障結構的變化。(3)新生SD大鼠自出生第二天始隔日皮下注射DES,與母鼠共同喂養(yǎng)至第18天和第25天兩個時間點心臟取血,ELISA方法檢測血液中TNFα濃度的變化。 結果:給予外源性雌激素后使:(1)Sertoli細胞FasL表達增強,并出現(xiàn)FasL分布區(qū)域的改變。(2)在18天實驗組,電鏡下顯示鑭大量透過血-睪屏障,到達生精上皮全層。(3)血液中TNFα濃度降低。 結論:(1

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