P53在高氧致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞KGFR表達(dá)變化中的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(AECⅡ)角化細(xì)胞生長因子受體(KGFR)在高氧暴露過程中表達(dá)的變化及其與P53的關(guān)系。
  方法:原代培養(yǎng)胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞,并隨機(jī)分為對照組、高氧組和高氧+Pifithrin組。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)ROS水平的變化;Real-time PCR檢測KGFR mRNA的表達(dá);Western Blot檢測細(xì)胞KGFR,P-P53(ser392)蛋白的表達(dá)。
  結(jié)果:(1)隨著高氧干預(yù)時間的延

2、長,肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞ROS值逐漸升高[(165.86±5.290)~(920.86±2.896),(P<0.01)],8h時達(dá)極點(diǎn);
  (2)與對照組比較,高氧1h時,胎鼠AECⅡKGFR mRNA的表達(dá)即明顯下降,4h時表達(dá)繼續(xù)下降。高氧1h和4h時,其表達(dá)量分別為對照組的0.89倍和0.45倍(P<0.01)。
  (3)Western blot結(jié)果顯示:與對照組比較,高氧4h時,胎鼠AECⅡKGFR蛋白的表達(dá)即明顯下

3、降,12h時達(dá)極點(diǎn),以后下降趨勢逐漸減弱。高氧4、8、12、24和48h時,其下降幅度分別為1.3、1.6、1.9、1.3和1.2倍(P<0.01)。高氧4、8和12h時,高氧組P-P53(ser392)蛋白的表達(dá)均明顯高于同時間點(diǎn)對照組(P<0.01)。并且在4h時達(dá)到高峰,然后隨時間的延長表達(dá)逐漸下降;與高氧組比較,高氧+Pifithrin組P-P53(ser392)蛋白的表達(dá)明顯下降(P<0.01),KGFR蛋白的表達(dá)得以恢復(fù)(P

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