幽門(mén)螺桿菌中性粒細(xì)胞激活蛋白口服核酸疫苗實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:構(gòu)建幽門(mén)螺桿菌(H. pylori)中性粒細(xì)胞激活蛋白(HP-NAP)口服DNA疫苗,評(píng)價(jià)其免疫治療作用.方法:PCR擴(kuò)增全長(zhǎng)napA(編碼HP-NAP),測(cè)序并同源性分析后,亞克隆入真核表達(dá)載體pIRES,雙酶切并PCR鑒定.將重組質(zhì)粒pIRES-napA轉(zhuǎn)化減毒鼠傷寒沙門(mén)菌SL7207,口服接種H. pylori感染的BALB/c小鼠,觀察其免疫治療作用.結(jié)果:PCR擴(kuò)增一435bp產(chǎn)物,核苷酸序列測(cè)定及BLAST分析表明,所

2、克隆序列與GenBank中H. pylori悉尼株(SS1)napA核苷酸及蛋白質(zhì)同源性均為98﹪.ANTHEPROT及DNAStar-ProteanTM軟件預(yù)測(cè)其蛋白質(zhì)具有良好的抗原性.經(jīng)PCR及雙酶切鑒定,證實(shí)成功構(gòu)建了攜帶napA的重組質(zhì)粒pIRES-napA及重組減毒鼠傷寒沙門(mén)菌疫苗株.治療組口服疫苗免疫后4周75﹪(3/4)小鼠快速尿素酶試驗(yàn)轉(zhuǎn)為陰性,對(duì)照組均陽(yáng)性(P=0.048).結(jié)論成功構(gòu)建了具良好免疫治療作用的HP-NA

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