1、本研究根據課題組長期從事于單子葉植物藍色花的研究結果，以18種蝴蝶蘭品種作為材料，通過表觀鑒定和解剖觀察對花色進行鑒定分類，用高效液相色譜、液質聯(lián)用對蝴蝶蘭色素成分進行定性與定量，于初選品種進行類黃酮代謝相關基因分析、瞬時表達。本研究對蝴蝶蘭類黃酮代謝途徑機理的揭示，對系統(tǒng)地調控蝴蝶蘭花色具有一定借鑒意義。取得的結果如下:
　　1.用高效液相色譜法（High performance liquid chromatography, H

2、PLC）建立類黃酮化合物的分析方法，結果表明，條件為流動相A為0.1％甲酸水，B為80％乙腈，洗脫程序0min，12％B;15min，25％B;32min，38％B;40min,38％B;45min，12％B;50min，12％B，可以達到良好的分離效果。
　　2.代謝分析表明，不同品種的蝴蝶蘭和葡萄風信子色素模式完全不同。蝴蝶蘭中520nm下分離出29種組分，主要花青苷類型為Cy和Pg型色素衍生物，黃酮和類黃酮主要為芹菜素衍生物

3、;葡萄風信子同波長條件下分離出14種組分，主要花青苷類型為Dp及其甲基化色素Pt、Mv衍生物，黃酮和類黃酮主要物質為山奈酚衍生物。
　　3.對不同蝴蝶蘭品種的類黃酮通路關鍵酶基因CHS、F3H、F3y'H進行表達分析，結果表明不同品種的基因各時期表達模式均有差異，但種內的三個基因表達趨勢一致。在紫紅色的品種中，基因的表達水平高于白色品種。
　　4.使用農桿菌介導法將PhCHS、PhDFR、PhF3'H等基因對應RNA干擾載體

4、和IhDFR、IhF3'5'H、MaDFR、MaF3'5'H、ThDFR、CcF3'5'H等基因對應過量表達載體對蝴蝶蘭進行瞬時轉化。三種基因的RNA干擾均存在花瓣顏色變淺的現(xiàn)象，pKANNIBAL-PhDFR和pKANNIBAL-PhCHS干擾效果相似，前者略明顯，使花瓣花青苷總量降低了約70％; PhF3'H的RNA干擾導致花瓣花青苷總量降低了60％，其反義片段只減少47％。過量表達未得到理想結果。菌株GV3101的效果優(yōu)于EHA1