1、前 言在諸多影響癌浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移的因素中， 普遍存在于細(xì)胞外基質(zhì) ( E C M ) 中 的 透明 質(zhì)酸( H A ) 與癌細(xì)胞表面 / 內(nèi) 部的 相 應(yīng)受體的 相互作用， 已 引起廣泛重視。 C D 4 4 是較早發(fā)現(xiàn)的透明質(zhì)酸( H A ) 受體。 該基因， 特 別是其拼接異構(gòu)物( C D 4 4 v ) 能夠促進(jìn)多 種人 類(lèi)癌細(xì) 胞的 轉(zhuǎn)移。 然而， 來(lái)自 膀耽癌的多數(shù)研 究結(jié)果顯示， C D 4 4 的 表 達(dá)隨腫瘤的 進(jìn)展而 呈進(jìn)

2、行性降低甚至消失。因 此提示在膀耽癌中可能存在 不依賴(lài)于C D 4 4 的 分子 通路， 為此 本文 檢測(cè)了C D 4 4 尤其 是拼接 異 構(gòu)物( C D 4 4 v ) 和另 一透明 質(zhì)酸 新受 體， 透明 質(zhì)酸介導(dǎo)的細(xì)胞游 走受體( R H A M M ) 在各類(lèi)膀朧腫瘤中的 表達(dá)情況， 并做比較性分析。一 良驗(yàn)材料本組5 2 例， 膀耽腫瘤4 2 例， 包括2 4 例膀耽表淺腫瘤( T i ， 一T I ) , 1 8 例膀 耽

3、浸潤(rùn)腫 瘤( 叭一 戈) ， 正常( 非癌) 膀朧粘 膜1 0 例， 取 自 前列腺 增生癥病 人。 腫瘤標(biāo)本在術(shù)后一 小時(shí)內(nèi) 采集， 液氮 速凍， 一 7 5 ℃ 儲(chǔ)存。 人膀耽癌細(xì)胞系 E j 及 B I U 在含 1 0 %小牛血清的R P M I 一 1 6 4 0 胎牛 血清( G i b c o , U S A ) 中 培養(yǎng)， 5 0 % C O , 濃 度， 3 7 ` C條件下孵育。實(shí) 驗(yàn) 方 法C D 4 4 和

4、R H A M M的 免疫組 織化學(xué)染色 : C D 4 4 s l y 共識(shí)別單克隆抗體A b 一 2 和 抗C D 4 4 v 6 單克隆 抗體V F F 一 1 8 由 德國(guó) 遺 傳學(xué) 研 究所H o f m a n n M提供。 抗人 R H A M M抗體由 英國(guó) 皇家癌癥研究所V A s s m a n n 博士提供。 首先用 A b 一 2 抗 C D 4 4 s l y 抗體篩選·1·性拼接分為正

5、常型 C D 4 4 ( C D 4 4 s ) 和變異型 C D 4 4 ( C D 4 4 v ) o C D 4 4 ， 尤 其 是C D 4 4 v ， 作 為H A 的 主 要 受 體 參 與 多 種 癌 癥的 侵 襲 和 轉(zhuǎn)移。 C D 4 4 v 在結(jié) 腸癌， 乳腺癌及非何杰金氏淋瘤等腫瘤中 的 過(guò)度表達(dá)常提示浸潤(rùn)性強(qiáng)， 預(yù)后不良 。包括 v 6 在內(nèi)的 C D 4 4 v 表達(dá) 常 見(jiàn)于 膀朧正常( 非癌) 粘

6、膜和 表淺乳頭狀癌， 但隨著癌細(xì)胞侵襲深度的 增加而下調(diào)甚至消失。 本研究亦發(fā)現(xiàn) C D 4 4 v 6 在膀耽表淺腫瘤的 表達(dá)率為4 5 . 8 %， 而在深層浸潤(rùn)性腫瘤中僅為2 2 . 2 %， 表達(dá)水平呈明顯下降趨勢(shì)， 這說(shuō)明 與其它器官腫瘤的 情況不同， 提示 C D 4 4 表 達(dá)與膀朧癌浸潤(rùn) 呈負(fù) 相關(guān)， 因 此在膀朧癌侵襲和轉(zhuǎn)移 機(jī) 制中， 存在某種不依賴(lài)于 C D “ 的分子通路。定位于人類(lèi)染色體5 8 3 3 . 2

7、 一 g t e r 上的 R H 人 M M蛋白是 H A的另一種受體， 根據(jù) R H A M M蛋白 在細(xì) 胞上的 分布特點(diǎn)， 將其分為 胞內(nèi) 和跨膜兩 種 類(lèi)型， 前者又稱(chēng)為細(xì)胞內(nèi)H A 結(jié)合蛋白， 即I H A B P , W e s t e r n印 跡雜交顯示， 除 分子量為M r 9 3 0 0 0 一 9 5 0 0 ( 》 的胞內(nèi)型 R H A M M外， 所有 被 檢 測(cè)的膀朧癌標(biāo)本均有 M r 7 2 0 0 0

8、 和6 4 0 0 0 的 膜型R H A M M表 達(dá)。 在正常( 非癌) 粘膜和各類(lèi)癌組織間， R H A M M表達(dá)陽(yáng) 性率有顯著差異， 而 且在各 類(lèi)癌 組織中 表達(dá)均明 顯提高， 與C D 4 4 不同的 是， 該現(xiàn) 象 貫 穿于 腫 瘤 發(fā) 展 全 過(guò) 程。 已 知R H A M M和I H A B P 都 能 與H A 結(jié)合， 但膜型蛋白 更易于 與H A 相互作用， 進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)柳 洲胞的 擴(kuò)散和 轉(zhuǎn)移， 因 而 推測(cè)