p73基因新轉錄產物的克隆及分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、p73基因是p73基因家族的第一個新成員,是1997年8月一個法國和美國聯(lián)合研究小組在篩選介導胰島素信號傳遞的因子時偶然得到的一個假陽性cDNA克隆,測序發(fā)現(xiàn)與p73非常相似,被稱為p73.其蛋白產物與p73蛋白在結構和功能上都有著驚人的相似,因互引起了腫瘤生物學家的極大關注.該研究首先應用于RT-PCR`Nested RT-PCR及HhaI限制性內切酶消化的方法,檢測了結腸癌LS174T細胞系p73mRNA第14外顯子中Ala557處

2、的多態(tài)性位點.為深入研究結腸癌LS174T細胞系中5'端序列發(fā)生變異的p73基因的新轉錄產物的結構和功能,研究人員應用5'-RACE方法(Rapid Amplifica-tion of cDNA Ends,cDNA末端快速擴增)獲得了等位基因(p73αCTGGA)的兩個5'-RACE片段,大小分別為2.0kb和1.6kb.研究人員推測這個新外顯子E1b的5'末端可能是p73cDNA的一個新的轉錄起始位點(即mRNA和CAP位點),也就是

3、說,p73基因可能有兩個轉錄起始位點,各自受到不同的啟動子的調控.從這兩個不同的轉錄起始位點開始轉錄,并經變位剪接(alternative splicing)可產生不同的轉錄產物.5'非翻譯區(qū)結構與蛋白質翻譯起始作用的調控有著密切的關系.該研究表明,應用5'-RACE方法在人結腸癌LS174T細胞系中克隆出的p73cDNA5'端序列變異的新外顯子E1b,可能含有p73cDNA的一個新的轉錄起始位點,并參與了p73基因轉錄和翻譯水平的廣泛

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