1、由于具有低毒性、生物可降解性、易于使用和吸附DNA能力強等特點,磷酸鈣納米顆粒是目前廣泛應用的非病毒載體之一,在許多哺乳動物細胞中進行體外轉染取得了很好的效果。然而,傳統(tǒng)型磷酸鈣納米載體的轉染效果受到pH值、DNA和CaCl2濃度、溫度、細胞類型和沉淀時間等多種因素的影響,并且,相比陽離子脂質體和其他多聚體來說,磷酸鈣轉染的可重復性差；磷酸鈣顆粒粒徑會隨著沉淀時間的延長而變大,從而導致轉染效率降低。
　　 在臨床試驗模型中,陽離

2、子穿膜多肽能將生物小分子及一些物質運輸至大部分組織和細胞中。魚精蛋白是一種類似于穿膜多肽的富含精氨酸的小分子多肽。在研究中,發(fā)現魚精蛋白覆蓋在DNA/磷酸鈣復合顆粒的表面能起到穩(wěn)定顆粒粒徑大小的作用,基于此,我們開發(fā)了一種魚精蛋白修飾的新型磷酸鈣納米基因載體。
　　 為研究魚精蛋白涂層對魚精蛋白-磷酸鈣復合顆粒的粒徑及轉染效率的影響,我們采用pEGFP-C1增強型綠色熒光蛋白作為轉染效率的指示標記,并以傳統(tǒng)型磷酸鈣納米基因載體作

3、為對照；采用原子力顯微鏡觀測顆粒的粒徑大小和形態(tài)；用細胞生長抑制試驗來測試載體對細胞的毒性作用。研究發(fā)現,在293 FT,HEK293和NIH3T3細胞中,魚精蛋白-磷酸鈣復合顆粒的轉染效率明顯高于傳統(tǒng)型磷酸鈣納米顆粒。原子力顯微鏡檢測顯示魚精蛋白-磷酸鈣復合顆粒的粒徑明顯小于傳統(tǒng)磷酸鈣顆粒。轉染效率的差異可能與顆粒的粒徑大小有關。與傳統(tǒng)磷酸鈣載體相比,魚精蛋白-磷酸鈣復合顆粒的穩(wěn)定性明顯增強,在4℃保存一周之后,轉染HEK293細胞,