1、目的：觀察腎康寧膠囊對(duì)小鼠急性和對(duì)大鼠長(zhǎng)期毒性作用。探討腎康寧膠囊對(duì)慶大霉素(GM)致大鼠腎臟損傷時(shí)腎功能以及血、尿中相關(guān)指標(biāo)的影響。采用高效液相色譜法測(cè)定腎康寧膠囊中黃芪甲苷的含量，以建立腎康寧膠囊的質(zhì)量控制方法。
　　方法：1.小鼠急性毒性試驗(yàn)：將腎康寧膠囊制成0.25g/mL的混懸液，每次按0.4ml/10g體重給小鼠灌服，一日內(nèi)給藥3次，每次間隔6h，按3次服用總量計(jì)算最大耐受量。給藥后連續(xù)觀察7d，記錄動(dòng)物反應(yīng)情況和體重

2、；大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)：將腎康寧膠囊配成濃度分別為1.6g/(kg.d)和5g/(kg.d)溶液，給予大鼠灌胃2mL/100g體重，3次/日，連續(xù)3個(gè)月，觀察大鼠的血液學(xué)指標(biāo)，包括(凝血時(shí)間，紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類(lèi)，血紅蛋白含量)、尿常規(guī)、血液生化學(xué)，包括AST，ALT，BUN，肌酐，葡萄糖，總膽固醇含量等指標(biāo)的變化，并觀察各臟器《心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、甲狀腺、睪丸或卵巢)情況及進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2.藥效學(xué)方面則采用

3、100mg/kg皮下注射慶大霉素導(dǎo)致大鼠急性腎損傷模型，給予腎康寧膠囊高(324g/L)、低(108g/L)劑量混懸液灌胃，3次/日，設(shè)模型組和空白對(duì)照組共為4組。治療28d，觀察各組大鼠血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、總蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的變化；另觀察各組尿蛋白、葡萄糖、酮體的變化及腎組織的病理學(xué)改變。3.采用HPLC法測(cè)定腎康寧膠囊中黃芪甲苷的含量，色譜柱：TIANHE()C18柱(200mm×4.6mm，5μm)；流

4、動(dòng)相：流動(dòng)相：甲醇：四氫呋喃：0.2％三乙胺水溶液(90:4:6)；流速0.8mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)230nm；柱溫30℃；進(jìn)樣量20μL
　　結(jié)果：小鼠急性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示，給藥后第一天小鼠行走時(shí)間和舉前足次數(shù)減少，其它方面未見(jiàn)異常，第二天后小鼠自主活動(dòng)，進(jìn)食等均正常，無(wú)一死亡，計(jì)算最大耐受量相當(dāng)于人用劑量(按每日服用量12g計(jì)算)的125倍。大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組相比，灌服腎康寧膠囊1.6和5g/(kg.d

5、)的兩高劑量組大鼠行為活動(dòng)及體重增長(zhǎng)正常，血液學(xué)、血液生化學(xué)、主要臟器重量、尿常規(guī)等各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著性差異。各組動(dòng)物器官組織均未見(jiàn)明顯毒性病理性變化。藥效學(xué)方面，高、低劑量的。腎康寧膠囊均能顯著降低由慶大霉素導(dǎo)致的急性腎損傷大鼠尿中蛋白總量、尿糖及酮體，恢復(fù)尿液pH，與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)；顯著降低腎損傷模型大鼠BUN、Cr含量，與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)；顯著提高腎損傷模型大鼠血清總蛋白、白蛋白總量P<0.

6、05)。同時(shí)低劑量組對(duì)大鼠腎損傷時(shí)臟器外觀出現(xiàn)的肥大以及不同程度的滲出血，皮質(zhì)與髓質(zhì)間出現(xiàn)紅斑等癥狀有所改善，而高劑量組幾乎看不到上述現(xiàn)象。黃芪甲苷在0.1031～1.2372mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.99983)，線性方程：Y=521559.44C-1356.36，平均回收率(n=9)為99.82％，RSD=0.29％，樣品平均含量0.3524mg/粒，RSD=0.96％。
　　結(jié)論：腎康寧膠囊1.6和5g/(k

7、g.d)連續(xù)口服灌胃3個(gè)月，對(duì)大鼠體重、尿常規(guī)、血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)及組織病理學(xué)無(wú)明顯影響；給予相當(dāng)于臨床劑量125倍的腎康寧膠囊對(duì)小鼠未產(chǎn)生急性毒性反應(yīng)，說(shuō)明腎康寧膠囊基本無(wú)毒性。在藥效上，腎康寧膠囊能有效減少慶大霉素致急性腎損傷大鼠的Cr、BUN水平，從而抑制高尿酸血癥的形成，減少尿酸鹽對(duì)腎臟的損害。腎康寧膠囊還可減少腎損傷大鼠腎小球?qū)Φ鞍?、血糖的濾過(guò)性，減少腎小球的高灌注，修復(fù)受損組織，使血漿蛋白水平趨于正常。本文所采用的HP