1、為探索轉抗蟲基因(BtCry3A)741楊對鞘翅目昆蟲的抗蟲性，本研究以7個轉基因株系CC70、CC71、CC31、CC11、CC22、CC84、CC53植株為檢測對象，以未轉基因的普通741楊為對照，從分子生物學檢測、毒蛋白的表達、對鞘翅目昆蟲的致死作用和不同外源基因的抗蟲選擇性4個方面對轉抗蟲基因(BtCry3A)741楊進行了分析，以期為轉抗蟲基因株系的擴繁和商品化生產提供科學依據。 根據PCR檢測結果可知，轉抗蟲基因(B

2、tCry3A)741楊7個株系和轉雙抗蟲基因(BtCrylAc+API)741楊的2個株系均檢測到目的基因的存在。Southern雜交分析得出，Bt基因已成功整合到轉抗蟲基因741楊中。 通過在五月份和九月份對轉抗蟲基因(BtCry3A)741楊當年生枝上部、中部、下部、韌皮部和木質部進行ELISA檢測的結果發(fā)現(xiàn)，五月份不同部位的葉片的毒蛋白的分布沒有形成一定的規(guī)律，而九月份毒蛋白含量成從高到低分布，且五月份的含量高于九月份；兩

3、個月份的木質部毒蛋白含量均高于韌皮部，且五月份的含量高于九月份。 通過抗蟲性試驗得出，柳藍葉甲(Plagioderaversicolora(Laicharting))幼蟲的死亡率在轉基因741楊各株系間差異性很小，各株系對柳藍葉甲幼蟲的致死作用均很強；并且各轉基因株系當年生枝上、中、下部葉片對幼蟲的致死作用沒有形成一定的規(guī)律，幼蟲的死亡率在1-2d之內均為100﹪。而在不同的溫度下，在35℃下，各株系對柳藍葉甲幼蟲的致死作用最強

4、；而在室溫，22℃，28℃下幼蟲的存活天數要多于在35℃下的存活天數，幼蟲第1d的死亡率也小于在35℃下的幼蟲。桑天牛(Aprionagermari(Hope))幼蟲體重增長均受轉基因741楊枝條和木質部的一定影響，用各株系飼養(yǎng)的桑天牛幼蟲均沒有用普通741楊飼養(yǎng)的體重增長的快，且個體沒有用普通741楊飼養(yǎng)的桑天牛幼蟲個體大。不同株系間，桑天牛蟲體重增長情況不同，存在一定差異。 通過對桑天牛成蟲的室外飼養(yǎng)結果可以得出，桑天牛對轉

5、抗蟲基因(BtCry3A)741楊的其中3個株系不作為產卵對象，其余作為產卵對象的除了CC22產卵粒數明顯少于對照。通過接種以后，各株系的當年的存活率均高于對照；但到了第2a調查存活率時，轉基因的各株系樹體內桑天牛幼蟲存活率均小于對照。 檢測轉不同基因楊樹對昆蟲的致死作用的選擇性，得出轉雙抗蟲基因(BtCrylAc+API)741楊對柳藍葉甲幼蟲和桑天牛幼蟲的生長和發(fā)育均沒有影響，柳藍葉甲可以順利的完成一個世代；桑天牛幼蟲的體重