1、背景：
　　脾腫大是門(mén)靜脈高壓綜合征及其他慢性肝臟疾病的并發(fā)癥之一，并潛在影響患者死亡率和降低患者生活質(zhì)量[1]。在肝硬化的不同階段脾腫大的發(fā)生率在36-92％之間[2]。特別在我國(guó)，病毒性肝炎后肝硬化失代償是引起脾腫大的重要原因之一。脾腫大可以壓迫腹腔其他臟器并引起相應(yīng)的臨床癥狀。巨脾有可能發(fā)生自發(fā)性破裂或因微小創(chuàng)傷而破裂[1]。而到目前為止，對(duì)脾腫大沒(méi)有特殊治療方法。YKL-40是“18-糖基水解酶”家族中的一員，到現(xiàn)在為止其

2、具體生物功能仍不甚清楚。有報(bào)道稱YKL-40可能參與細(xì)胞外基質(zhì)重塑和基質(zhì)降解[3]，先天性肺纖維化患者支氣管巨噬細(xì)胞有大量表達(dá)的YKL-40蛋白提示可能參與組織重塑和纖維化過(guò)程[4,5]。YKL-40也可以促進(jìn)軟骨細(xì)胞和滑膜細(xì)胞的增殖[6]。眾多實(shí)驗(yàn)表明YKL-40在人類(lèi)疾病組織重塑過(guò)程中有重要作用，但YKL-40是否參與門(mén)靜脈高壓脾腫大組織重塑過(guò)程尚未得到證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組織化學(xué)技術(shù)、蛋白免疫印記技術(shù)及Masson三色纖維染色技術(shù)

3、檢測(cè)YKL-40和MMP-9及脾腫大纖維化程度，比較YKL-40與MMP-9、脾腫大纖維化程度及其他臨床資料的相關(guān)程度，進(jìn)而探討YKL-40在門(mén)靜脈高壓脾臟組織重塑過(guò)程的作用及可能途徑。
　　目的：
　　研究YKL-40蛋白在門(mén)靜脈高壓脾臟中異常表達(dá)，分析其在門(mén)靜脈高壓脾臟纖維化重塑過(guò)程中的作用及與其他臨床參數(shù)的相關(guān)性。通過(guò)與MMP-9蛋白相關(guān)性研究找到Y(jié)KL-40發(fā)生作用的可能通路，以期為門(mén)靜脈高壓脾臟腫大的臨床診斷、治療

4、等各方面提供新的理論支持和幫助。
　　方法：
　　1．采用免疫組織化學(xué)法，分別檢測(cè)人正常脾臟及門(mén)靜脈高壓患者脾臟中YKL-40蛋白和MMP-9蛋白表達(dá)情況，分析YKL-40蛋白表達(dá)與臨床資料參數(shù)之間及與MMP-9蛋白表達(dá)之間的相關(guān)性；
　　2．采用蛋白免疫印跡技術(shù)，分別檢測(cè)人正常脾臟及門(mén)靜脈高壓患者脾臟中YKL-40蛋白和MMP-9蛋白表達(dá)情況，結(jié)合免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)的結(jié)果，定性和半定量的分析YKL-40蛋白表達(dá)與臨

5、床資料參數(shù)之間及與MMP-9蛋白表達(dá)之間的相關(guān)性；
　　3．采用Masson三色纖維染色技術(shù)，分析正常脾臟及門(mén)靜脈高壓患者脾臟纖維化程度，并比較YKL-40蛋白表達(dá)與脾臟纖維化程度的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1．免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果示：YKL-40蛋白為細(xì)胞胞漿表達(dá)，主要分布于脾臟紅髓、邊緣區(qū)而不表達(dá)于淋巴小結(jié)，偶爾表達(dá)于增殖的血管平滑肌。門(mén)靜脈高壓患者脾臟YKL-40蛋白表達(dá)明顯高于正常脾臟，兩組YKL-40表達(dá)具有

6、顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），且其表達(dá)程度隨Child-Pugh分級(jí)增高而增高（P<0.05）。另外，YKL-40蛋白表達(dá)與患者自由門(mén)靜脈壓力呈正相關(guān)（R=0.499,P<0.01）；MMP-9蛋白主要定位于巨噬細(xì)胞或中性粒細(xì)胞胞漿中，主要分布于紅髓、邊緣區(qū)。MMP-9陽(yáng)性細(xì)胞在門(mén)靜脈高壓患者脾臟和正常脾臟表達(dá)百分率分別為25.2％±0.90％和37.7％±1.27％，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）。Spearman相

7、關(guān)性分析表明YKL-40蛋白表達(dá)與MMP-9表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（R=-0.839,P<0.01）。
　　2．蛋白免疫印跡檢測(cè)結(jié)果示：門(mén)靜脈高壓患者脾臟YKL-40蛋白表達(dá)明顯高于正常脾臟，兩組YKL-40表達(dá)具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），且其表達(dá)程度隨Child-Pugh分級(jí)增高而增高（P<0.05）；MMP-9蛋白表達(dá)量在門(mén)靜脈高壓脾臟中較正常脾臟高，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3．采用Masson三色纖

8、維染色技術(shù)，分析正常脾臟及門(mén)靜脈高壓患者脾臟纖維化程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：門(mén)靜脈高壓脾臟中纖維增生較正常脾臟明顯增生，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），Spearman相關(guān)性分析表明YKL-40蛋白表達(dá)與纖維化程度呈正相關(guān)（R=0.857,P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　YKL-40在門(mén)靜脈高壓脾臟中較正常脾臟表達(dá)增高，且與FPP、Child-Pugh分級(jí)相關(guān)。YKL-40表達(dá)與脾臟纖維化程度成正相關(guān)，提示YKL-40可