1、研究目的： 觀察消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后骨癌痛大鼠機(jī)械痛閾、體重、血清骨代謝指標(biāo)Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽(ICTP)和骨特異堿性磷酸酶(BAP)及不同組織辣椒素受體1(TRPV1)表達(dá)的變化，探討消痰通絡(luò)凝膠對(duì)骨癌痛的作用及可能機(jī)制。 研究方法： 1．模型驗(yàn)證：建立大鼠Walker-256脛骨癌痛模型，將Wistar雌鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型早處理組和模型晚處理組。除假手術(shù)組脛骨注射PBS，其余各組通過脛骨注射Walker

2、-256腫瘤細(xì)胞建立骨癌痛模型。模型早處理組于造模14天腹主動(dòng)脈取血處死后取材，其余各組于造模21天腹主動(dòng)脈取血后處死取材。觀察造模后大鼠機(jī)械痛閾值、基本狀態(tài)和體重的變化、接種側(cè)脛骨組織學(xué)改變以及大鼠血清ICTP和BAP在造模不同時(shí)段的水平變化。2．觀察消痰通絡(luò)凝膠的作用：同上建立大鼠脛骨癌痛模型，將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組和治療組。自第14天開始給藥，假手術(shù)組和模型組外用空白凝膠，治療組外用消痰通絡(luò)凝膠，(0.5g/只

3、，2次/日)，連續(xù)7天，陽(yáng)性對(duì)照組于第14天皮下注射唑來膦酸注射液0.4mg/kg一次，第21天所有大鼠腹主動(dòng)脈取血處死后取材。①觀察消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后大鼠機(jī)械痛覺超敏的變化；②觀察各組人鼠基本狀態(tài)、體重變化；③檢測(cè)消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后大鼠血清ICTP及BAP的水平變化；④檢測(cè)消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后大鼠脛骨及下丘腦TRPV1表達(dá)的變化，并進(jìn)一步檢測(cè)凝膠干預(yù)對(duì)下丘腦TRPV1蛋白活性及mRNA表達(dá)的影響。 結(jié)果： 1．模型復(fù)制：

4、大鼠模型早處理組及模型晚處理組逐漸出現(xiàn)右側(cè)肢體機(jī)械痛覺超敏閾值下降，假手術(shù)組無明顯改變。造模第14天，假手術(shù)組、模型早處理組及模型晚處理組大鼠機(jī)械性痛覺超敏閾值分別為6.20±2.43g、3.72±1.49g及3.45±1.89g，模型早處理組及模型晚處理組機(jī)械痛覺超敏閾值明顯低于假手術(shù)組(p＜0.05)；至第21天假手術(shù)組和模型晚處理組機(jī)械痛覺超敏閾值分別為6.61±2.88g和1.84±0.35g，模型晚處理組閾值較假手術(shù)組明顯降低

5、(p＜0.05)，并低于該組第14天閾值(p＜0.05)。病理顯示模型組脛骨有腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)及骨小梁的破壞，假手術(shù)組無明顯結(jié)構(gòu)異常。模型早處理組和晚處理組大鼠體重基本無增加，而假手術(shù)組大鼠體重平穩(wěn)增加。模型早處理組及晚處理組血清ICTP及BAP水平分別為(88.47±11.62 U/L，291.93±34.34U/L)和(100.17±12.31 U/L，355.78±44.00U/L)較假手術(shù)組(11.76±1.19 U/L，185.7

6、3±3.68 U/L)明顯升高，且模型晚處理組高于模型早處理組。 2．消痰通絡(luò)凝膠對(duì)骨癌痛大鼠的影響 ①第21天運(yùn)用消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后，大鼠機(jī)械痛覺超敏閾值(4.86±1.59g)較模型組(1.85±0.35g)明顯升高(p＜0.05)，并與陽(yáng)性對(duì)照組(4.83±1.42g)無明顯差異(p＞0.05)； ②運(yùn)用消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后大鼠體重逐漸增加，第21天為(157.31±6.04g)明顯高于模型組(136.19±

7、8.32g)(p＜0.05)，與陽(yáng)性對(duì)照組無明顯差異(156.13±6.37g)(p＞0.05)； ③運(yùn)用消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后大鼠血清ICTP水平(41.90±8.39 U/L)較模型組(93.68±9.82U/L)明顯降低(p＜0.05)，與陽(yáng)性對(duì)照組(42.04±9.93U/L)作用相近(p＞0.05)。消痰通絡(luò)凝膠干預(yù)后大鼠血清BAP水平(358.33±38.87U/L)與模型組(378.78±39.48U/L)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

8、(p＞0.05)，而陽(yáng)性對(duì)照組BAP水平(261.27±37.66 U/L)明顯低于模型組(p＜0.05)； ④各組大鼠在脛骨及下丘腦均有TRPV1陽(yáng)性表達(dá)，模型組較假手術(shù)組TRPV1陽(yáng)性表達(dá)明顯增加(p＜0.05)，治療組TRPV1陽(yáng)性表達(dá)較模型組明顯降低(p＜0.05)，而陽(yáng)性對(duì)照組TRPV1陽(yáng)性表達(dá)與模型組無明顯差異(p＞0.05)。其mRNA結(jié)果及western blot檢測(cè)結(jié)果與此一致。 結(jié)論： 1．本