1、中藥已成為惡性腫瘤治療的研究熱點，其治療機理可能是通過改善免疫系統(tǒng)功能來進行實現(xiàn)的。本研究旨在通過研究益宮膠囊的藥代動力學過程及體內(nèi)抗腫瘤作用，揭示其相關的抗腫瘤作用機制，從而為將其更好地應用于臨床研究提供客觀和科學的依據(jù)。
　　 本研究首先分析益宮膠囊的藥代動力學過程，通過建立SPE-HPLC 方法，固相萃取血漿后，高效液相色譜法檢測益宮膠囊中四種重要香豆素的濃度。其次，為了分析益宮膠囊體內(nèi)抗腫瘤作用，本研究建立了小鼠S180

2、 實體瘤、腹水瘤及環(huán)磷酰胺致小鼠免疫抑制模型，觀察益宮膠囊抑瘤率、生命延長率、增效作用及對免疫抑制小鼠胸腺、脾臟重量及血清IgG 水平的影響；基于體外分離小鼠腹腔巨噬細胞、脾淋巴細胞和自然殺傷細胞建立二硝基氯苯所致遲發(fā)型過敏反應模型，并采用炭粒廓清法研究益宮膠囊對小鼠免疫系統(tǒng)的影響；應用熒光素酶報告系統(tǒng)、MTT 法、CCK-8 法、Brdu 法、RT-PCR、Western-Blotting和流式細胞術探尋益宮膠囊的免疫增強分子學機制；

3、利用HMEC-1細胞觀察其對細胞管腔形成、細胞遷移的影響。
　　 研究結果表明，大鼠血漿中四種香豆素達峰時間為0.75±0.21 h、1.00±0.32 h、2.00±0.27 h和1.00±0.36 h。單用益宮膠囊 1.6 g·kg-1、3.0 g·kg-1、5.0g·kg-1 對S180 實體瘤抑制率為20.99％、26.54％和35.98％；對S180 腹水型腫瘤小鼠存活時間延長率為5.15％、11.85％和35.15％

4、；與環(huán)磷酰胺合用時抑制率為29.44％、38.79％和44.39％；與氟尿嘧啶合用時對小鼠存活時間延長率為14.12％、22.70％和41.42％；可顯著提高免疫抑制小鼠胸腺、脾臟重量指數(shù)及血清IgG 含量（P<0.05）。益宮膠囊 1.6 g·kg-1、3.0 g·kg-1、5.0 g·kg-1 對正常小鼠和移植瘤小鼠腹腔巨噬細胞、淋巴細胞、自然殺傷細胞的殺瘤率分別為20.99％、29.04％、36.08％；26.69％、30.94％

5、、37.97％；19.09％、27.15％、35.04％；28.53％、31.87％、40.10％；24.26％、26.12％、28.80％；24.54％、29.04％、42.00％；對腹腔巨噬細胞吞噬能力無明顯影響；對荷瘤小鼠的吞噬指數(shù)K 及校正吞噬指數(shù)?均有增強（P<0.05）。益宮膠囊0.1、1、10 μg/ml 均能激活NF-κB 轉(zhuǎn)錄活性；可使小鼠S180細胞、小鼠腹腔巨噬細胞、小鼠脾淋巴細胞p65mRNA和蛋白的表達量升高；

6、不能夠激活小鼠S180細胞、小鼠腹腔巨噬細胞、小鼠脾淋巴細胞的NF-κB，MAPKs和PI3K/Akt 信號通路；可使小鼠S180 腫瘤細胞阻滯于S 期，但對HMEC-1細胞遷移和管腔形成沒有影響。
　　 本研究建立了適合于灌胃給予益宮膠囊后大鼠血漿中四種香豆素的檢測方法并對其進行了驗證。本研究的結果表明，益宮膠囊可顯著抑制小鼠腫瘤生長，增強環(huán)磷酰胺和氟尿嘧啶的抗腫瘤作用并可緩解磷酰胺引起的免疫功能抑制；可提高小鼠腹腔巨噬細胞和

7、脾淋巴細胞的殺瘤活性，提高自然殺傷細胞殺傷能力，但不能提高腹腔巨噬細胞吞噬能力；可增強小鼠DNCB所致遲發(fā)型過敏反應，促進網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能；能激活NF-κB轉(zhuǎn)錄活性；增加細胞中p65表達量；對NF-κB，MAPKs和PI3K/Akt信號通路無影響；是S期小鼠S180腫瘤細胞阻滯劑；但在體外不能促進HMEC-1內(nèi)皮細胞遷移且同樣不能促進其形成管腔結構。本研究揭示了益宮膠囊在體內(nèi)抗腫瘤的作用機理，為將其更好地應用于臨床研究提供了相關依