大足黑山羊妊娠不同階段胎盤(pán)線粒體結(jié)構(gòu)及能量代謝的比較.pdf_第1頁(yè)
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1、山羊胎盤(pán)屬于子葉型胎盤(pán)(cotyledons placenta),具有造血、運(yùn)輸、代謝、內(nèi)分泌、屏障和免疫等許多重要功能。胎盤(pán)循環(huán)建立后,胎兒通過(guò)胎盤(pán)子葉獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而胎盤(pán)子葉細(xì)胞中的線粒體通過(guò)氧化磷酸化產(chǎn)生ATP,為母-胎的營(yíng)養(yǎng)運(yùn)輸提供動(dòng)力。因此,胎盤(pán)線粒體發(fā)揮正常功能是保證胎兒生長(zhǎng)發(fā)育,進(jìn)而維持妊娠的關(guān)鍵。若胎盤(pán)組織中線粒體功能不足則會(huì)導(dǎo)致胎盤(pán)物質(zhì)運(yùn)輸障礙,胎兒體重降低,甚至引發(fā)宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩。目前對(duì)山羊妊娠過(guò)程中胎兒及胎盤(pán)發(fā)育的研

2、究相對(duì)匱乏,尤其是在胎盤(pán)線粒體結(jié)構(gòu)及能量代謝的研究上幾近空白。
  大足黑山羊是具有高繁性能的山羊遺傳資源,主要分布于重慶大足及周邊地區(qū)。本實(shí)驗(yàn)前期研究結(jié)果表明大足黑山羊產(chǎn)羔數(shù)與胎盤(pán)效率呈正相關(guān)趨勢(shì),但在妊娠過(guò)程中胎盤(pán)效率的變化規(guī)律尚不清楚,同時(shí)也缺乏對(duì)線粒體結(jié)構(gòu)和能量代謝方面的研究,這些問(wèn)題都限制了我們了解大足黑山羊妊娠發(fā)育過(guò)程及胎盤(pán)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能。因此本研究通過(guò)測(cè)定妊娠不同階段大足黑山羊胎兒及胎盤(pán)發(fā)育情況,對(duì)線粒體結(jié)構(gòu)及能量代謝

3、進(jìn)行比較,以此探究大足黑山羊妊娠過(guò)程中胎盤(pán)效率及胎盤(pán)線粒體結(jié)構(gòu)和功能的變化,為深層次解析胎盤(pán)在維持大足黑山羊胎兒正常妊娠過(guò)程中的作用提供參考。
  本試驗(yàn)以妊娠20、25、30、60、90和120d的大足黑山羊胎兒及胎盤(pán)為研究對(duì)象,采用HE染色切片、超顯微透射電鏡、酶聯(lián)反應(yīng)等方法,對(duì)大足黑山羊胎盤(pán)發(fā)育、線粒體結(jié)構(gòu)和能量代謝進(jìn)行研究;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法,比較胎盤(pán)線粒體基因的表達(dá)量變化。主要研究結(jié)果如下:
  1、試驗(yàn)觀

4、察妊娠早期的胎盤(pán)發(fā)現(xiàn)其分化快于胎兒,并在妊娠30d時(shí)已延伸至雙側(cè)子宮角。在妊娠60至90d,胎兒以13.09g/d的速度增重,妊娠120d后胎兒以34.911g/d的速度增重。胎盤(pán)效率隨著妊娠時(shí)間而逐漸增長(zhǎng),由妊娠20d時(shí)的0.194升高至妊娠120d時(shí)的2.692,并且差異極顯著(P<0.01)。通過(guò)組織切片觀察胎盤(pán)結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),妊娠20、25和30d的胎盤(pán)細(xì)胞數(shù)量增多,密度增加,胎盤(pán)逐漸形成腔室結(jié)構(gòu)。在妊娠60d后,胎盤(pán)子葉絨毛數(shù)量增多

5、,長(zhǎng)度增加,并逐漸深入子宮阜肌層。
  2、通過(guò)超微電鏡觀察線粒體結(jié)構(gòu)變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)胎盤(pán)線粒體形態(tài)完整,數(shù)量隨著妊娠進(jìn)行而增多并大量聚集在子葉絨毛處附近。
  3、試驗(yàn)對(duì)胎盤(pán)子葉組織中線粒體細(xì)胞色素C氧化酶、琥珀酸脫氫酶、Ca++-Mg++-ATP酶和Na+-K+-ATP酶的活性測(cè)定發(fā)現(xiàn),在妊娠過(guò)程中胎盤(pán)子葉線粒體酶活性極顯著增加(P<0.01),其中妊娠90至120d的上升趨勢(shì)明顯,表明線粒體能量代謝逐漸增強(qiáng)。
  

6、4、在妊娠25d的胎盤(pán)子葉及子宮阜中基因COXIV、SDHA、TFAM、PGC-1ɑ、NRF-1的表達(dá)量達(dá)到高峰,至妊娠30d則顯著降低,其中線粒體COXIV基因在子葉中的表達(dá)量由0.84降至0.09,差異極顯著(P<0.01),核基因PGC在子葉中的表達(dá)量由1.21降至0.665,核基因NRF在子葉中的表達(dá)量由1.06降至0.223,核基因TFAM在子宮阜中的表達(dá)量由3.07降至1.32。妊娠60d后胎盤(pán)循環(huán)已建立,線粒體相關(guān)基因在子

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