1、背景:哮喘是一種以嗜酸性粒細胞(EOS)浸潤為主，多種細胞(中性粒細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等)參與的慢性氣道變應性炎癥。氣道高反應性(BHR)和慢性炎癥是哮喘的基本特征。在肺部，氣道平滑肌主要由副交感神經(jīng)的迷走神經(jīng)纖維支配，迷走神經(jīng)的作用是通過神經(jīng)纖維釋放神經(jīng)介質(zhì)乙酰膽堿(ACh)作用于相應的受體而形成的。1914年SirHenryDale把ACh受體分為兩類：煙堿受體(N)和毒蕈堿受體(M)。M受體有5個亞型(M1-M5)。5種M受體

2、亞型中，人肺只表達其中的3種(M1，M2和M3)，它們分布在氣道的不同部分。M1受體位于氣道的副交感神經(jīng)節(jié)，其激動劑是McN-A-343，拮抗劑是哌侖西平。M1受體興奮時可加速神經(jīng)傳遞，增強膽堿能神經(jīng)的功能，同時在肺泡壁也發(fā)現(xiàn)Mi受體的存在，但其功能還不清楚。M2受體主要位于節(jié)后膽堿能神經(jīng)纖維末梢，其激動劑是匹羅卡品，拮抗劑是加拉銨、AF-DX116、methoctramine。M2受體的功能主要是通過負反饋的形式調(diào)節(jié)ACh的釋放，所以

3、又稱為自身受體。興奮性M3受體主要分布于氣道平滑肌以及粘膜腺體，其選擇性激動劑尚未發(fā)現(xiàn)，拮抗劑有4-DAMP、HHD，M3受體興奮可直接引起氣道平滑肌收縮以及腺體分泌。副交感神經(jīng)釋放ACh作用于M3受體引起氣道平滑肌收縮，ACh的釋放受控于M2受體。在哮喘患者和哮喘動物模型中M2受體功能異常，從而導致ACh的釋放增加，引起氣道平滑肌收縮，粘液腺過度分泌，導致BHR。EOS是哮喘發(fā)病的主要炎癥細胞，EOS胞質(zhì)內(nèi)含有大量顆粒蛋白，這些顆粒蛋

4、白主要有嗜酸性粒細胞主要堿性蛋白(MBP)、嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)、嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPO)、嗜酸性粒細胞神經(jīng)毒素(EDN)等，其中MBP被認為是誘導M2受體功能異常、導致BHR的關鍵物質(zhì)。 目的:本課題通過制備哮喘豚鼠模型，比較正常組、哮喘組以及地塞米松治療組肺泡灌洗液(BALF)中的細胞總數(shù)與細胞分類、肺組織病理學蘇木素-伊紅染色(HE染色)、乙酰膽堿酯酶(AchE)以及M2R免疫組化，研究氣管平滑肌內(nèi)M2

5、RmRNA、M3RmRNA以及MBP的mRNA表達情況，了解豚鼠哮喘模型氣管及肺組織內(nèi)炎癥細胞的浸潤、嗜酸性粒細胞的神經(jīng)趨化以及毒蕈堿受體(MR)、MBP在基因表達上的變化，應用地塞米松治療哮喘豚鼠，觀察地塞米松對消除炎癥細胞，尤其是EOS的浸潤及其對MR、MBP表達的影響，進一步研究糖皮質(zhì)激素治療哮喘的靶點。 結論: 1、哮喘豚鼠肺泡灌洗液內(nèi)EOS增加，肺組織EOS浸潤明顯，EOS具有迷走神經(jīng)趨化現(xiàn)象； 2、哮