1、血管瘤(hemangioma)是嬰幼兒最常見的先天性良性腫瘤，新生兒發(fā)病率2-3％，1歲以下兒童的發(fā)病率在10％左右。普萘洛爾作為非選擇性β-腎上腺素受體阻滯劑，主要用于治療心臟疾病如高血壓、心絞痛、心動過速等。2008年，法國醫(yī)生Léauté-Labrèze C等偶然發(fā)現(xiàn)該藥可有效抑制血管瘤的增殖，并加速瘤體消退。之后，國內(nèi)外眾多學者也相續(xù)將其應(yīng)用于血管瘤的治療，廣泛的臨床應(yīng)用證實了該藥對血管瘤具有明顯療效。
　　口服普萘洛爾治

2、療增生期血管瘤療效顯著，同時對消退期血管瘤也有一定效果，目前已逐步取代激素成為治療嬰幼兒血管瘤的一線用藥。然而，兒童口服普萘洛爾尚存在很多潛在的副作用，尤其是口服初期，需住院檢測心率、血壓、血糖等指標，給患兒家長及醫(yī)師帶來諸多不便。能否改變給藥途徑，采取瘤體局部外涂普萘洛爾制劑的方式，以減輕口服藥物所致的潛在不良反應(yīng)，鑒于此，在第一章第一部分通過對25例門診“等待觀察”的淺表型嬰幼兒血管瘤患者初步嘗試應(yīng)用1％普萘洛爾軟膏外涂治療，結(jié)果表

3、明療效顯著且未發(fā)現(xiàn)可檢測到的與外用普萘洛爾軟膏相關(guān)的不良反應(yīng)。此外，口服普萘洛爾治療血管瘤，國內(nèi)外文獻較多集中在對療效評估，而對服藥期間因治療所致的副作用或不良反應(yīng)發(fā)生情況研究尚存在不足。故在本章第二部分，回顧性分析近年來我科接受口服普萘洛爾治療的106例血管瘤患兒，以評估藥物治療相關(guān)的副作用或不良反應(yīng)發(fā)生情況，為用藥安全提供依據(jù)。
　　Folkman等學者認為，血管瘤是一種血管形成性質(zhì)疾病，失控的血管生成是其增殖的主要因素。該過

4、程包括了內(nèi)皮細胞增殖、細胞外基質(zhì)的選擇性降解、細胞的遷移以及血管通透性的增加。細胞生長因子是一類能誘導或促進新血管形成的物質(zhì)，可調(diào)控內(nèi)皮細胞的增殖，影響血管形成，對血管瘤的發(fā)生發(fā)展起關(guān)鍵作用。類表皮生長因子域7(EGFL7)是一種內(nèi)皮細胞特異性分泌因子，選擇性地表達于腫瘤新生血管和增生性組織中，在血管生成過程中起關(guān)鍵作用。由此我們提出：
　?、貳GFL7是否在血管瘤組織中表達及在該病發(fā)生發(fā)展的不同時期是否存在差異表達？
　　

5、②普萘洛爾對血管瘤顯著的臨床療效是否通過抑制EGFL7表達？
　　上述問題是進一步研究普萘洛爾對血管瘤作用機制所要解決的問題。鑒于此，第二章第一部分利用免疫組織化學染色技術(shù)檢測類表皮生長因子域7(EGFL7)在嬰幼兒血管瘤組織中的表達，并探討其在血管瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用和意義。本章第二部分，通過檢測普萘洛爾干預(yù)下人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)增殖、成管、凋亡及EGFL7的表達影響，初步探討普萘洛爾抑制血管瘤增生的作用機制。

6、>　　第一章普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤臨床觀察
　　第一部分普萘洛爾外用軟膏治療淺表型嬰幼兒血管瘤療效評估
　　目的：探討局部外涂普萘洛爾軟膏治療淺表型嬰幼兒血管瘤的臨床療效及安全性。
　　方法：本組共25例（共28處血管瘤，女21例，男4例，年齡1月至10月，平均4個月）淺表型嬰幼兒血管瘤患兒，門診接受瘤體表面外涂1％普萘洛爾軟膏，每日3次，均勻涂于瘤體表面，時間5周至59周（平均21周），依據(jù)服藥前后瘤體表面張力、大

7、小、顏色變化，按照顯著有效、部分有效、無效3級評分法對近期療效進行評價。同時，觀察用藥后副作用以評估用藥安全性。
　　結(jié)果：28處血管瘤中，16(57％)例顯著有效;9(33％)例部分有效;3(10％)例為無效。1％普萘洛爾軟膏對淺表型嬰幼兒血管瘤的總有效率為90％(95％可信區(qū)間72％-98％)。所有患兒均未出現(xiàn)可檢測到的不良反應(yīng)。
　　結(jié)論：外涂普萘洛爾軟膏能有效促進淺表型嬰幼兒血管瘤的消退，且未發(fā)現(xiàn)口服普萘洛爾常見的不

8、良反應(yīng)，可以作為嬰幼兒血管瘤隨訪觀察期間的一種安全、有效輔助治療手段。
　　第二部分口服普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤不良反應(yīng)觀察
　　目的：觀察口服普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤不良反應(yīng)，評估其用藥安全性。
　　方法：2009年9月至2013年11月間山東省立醫(yī)院燒傷整形美容科口服普萘洛爾治療的106例嬰幼兒血管瘤患兒，女性71例，男性35例，年齡1-14個月（平均5.1個月）。服藥劑量每日1-1.5mg/kg，分3次給藥，隨訪

9、2-10個月，期間對出現(xiàn)的用藥相關(guān)副作用或并發(fā)癥進行安全性評估。
　　結(jié)果：106例患兒服藥期間及隨訪階段瘤體均得到有效控制且有程度不同的消退。18例病人（17％，18/106，4例并發(fā)兩種以上副作用）出現(xiàn)與用藥相關(guān)的副作用，其中10(9.4％)例口服期間發(fā)生腹瀉，7(6.6％)例出現(xiàn)一過性血壓下降，2(1.9％)例溢奶，2(1.9％)例夜間睡眠差，易激和四肢末端發(fā)涼各1例(0.94％)。
　　結(jié)論：小劑量（1-1.5mg/

10、kg.day）、分次口服普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤療效顯著，且不良反應(yīng)發(fā)生率低，用藥安全，可作為嬰治療幼兒血管瘤的用藥選擇。
　　第二章普萘洛爾抑制嬰幼兒血管瘤增殖的機制探討
　　第一部分類表皮生長因子域7(EGFL7)在嬰幼兒血管瘤組織中的表達及意義
　　目的：檢測類表皮生長因子域7(EGFL7)在不同時期嬰幼兒血管瘤組織中的表達情況并探討其在該病發(fā)生發(fā)展過程中的作用及意義。
　　方法：收集2007年5至2013

11、年9月山東大學附屬省立醫(yī)院燒傷整形美容科手術(shù)切除組織病理診斷為嬰幼兒血管瘤的石蠟標本49例（男16例，女33例），依據(jù)Mulliken標準將標本分成增生期組、退期組、消退完成期組，以正常皮膚作為對照組。應(yīng)用免疫組織化學法對各期嬰幼兒血管瘤組織及正常皮膚中的類表皮生長因子域7(EGFL7)表達情況進行檢測，利用計算機圖像分析技術(shù)分別測量其平均光密度。
　　結(jié)果：EGFL7陽性反應(yīng)定位于血管瘤細胞胞漿中，在血管瘤增生期強陽性或陽性表達

12、，消退期陽性表達，消退完成期和正常皮膚中弱陽性或陰性性表達。
　　結(jié)論：EGFL7與增生期嬰幼兒血管瘤關(guān)系密切，參與了嬰幼兒血管瘤病理變化過程，在該病增生期和消退早期細胞增殖和血管形成階段起重要作用。
　　第二部分普萘洛爾對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)生物學行為及EGFL-7表達的影響
　　目的：探討普萘洛爾對人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖、成管能力、凋亡及EGFL-7表達影響，為進一步研究普萘洛爾治療嬰幼兒血管瘤機制提供理論

13、依據(jù)。
　　方法：以離體的人臍靜脈內(nèi)皮細胞為實驗對象，采用MTT法、成管實驗、流式細胞儀測定不同濃度的普萘洛爾（0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、125μmol/L、150μmol/L、175μmol/L、200μmol/L）對HUVEC增殖、成管能力、凋亡的影響及RT-PCR、western blot法測定類表皮生長因子域-7的變化。
　　結(jié)果：普萘洛爾藥物干預(yù)24和48小時后，藥物濃

14、度為≥25um時對人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖能力的抑制率與正常對照組相比有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，且在25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、125μmol/L濃度下抑制率成明顯上升趨勢;流式細胞儀檢測不同濃度普萘洛爾實驗組和空白組對比（24小時），細胞凋亡率逐步增加;藥物處理組24h細胞成管個數(shù)與陰性對照無統(tǒng)計學差異，48小時對成管能力有一定抑制作用;RT-PCR和Western blot實驗結(jié)果顯示藥物處理組與空白組對