1、巨核細胞產生血小板是一個復雜的過程，受到多種細胞因子的調控。如白介素1、白介素3、白介素6、白介素11、干細胞因子、粒集落刺激因子、血小板生成素(Thrombopoietin，TPO)等。TPO通過與巨核細胞表面的血小板生成素受體(Myeloproliferativeleukemia，MPL)結合，引導信號傳導通路，在體外刺激巨核細胞集落(Colonyformingunitsofmegakaryocyte，CFU-MK)形成，在體內升高

2、血小板的水平。然而，在巨核細胞成熟和血小板形成的過程中，TPO并不是必須的細胞因子。因為在TPO敲除鼠的實驗中，雖然巨核細胞和血小板的數(shù)量減少85-90％，但并不影響血小板的功能。這說明在血小板的形成過程中可能存在其它因子的作用。 本實驗室前期研究中，使用Mpl的胞外區(qū)(Mpl-EC)作為誘餌蛋白，用酵母雙雜交系統(tǒng)，從人體胎肝cDNA文庫中分離到了人核遷移蛋白(HumannucleardistributionC，hNUDC)與M

3、pl的胞外區(qū)相互作用。隨后通過GSTpull-down、免疫沉淀和熒光定位試驗證明了hNUDC是Mpl的另一個配體。NUDC首先是在絲狀真菌Aspergillusnidulans中作為調控核遷移的nud基因發(fā)現(xiàn)的，A.nidulansNUDC基因在人中的同源物(hNUDC)已被克隆。hNUDC是一種在多種細胞中與微管動力中心結合并且相互作用的多功能蛋白。由于NUDC與TPO都與MPL結合，而兩者又沒有相同序列，為了檢測NUDC是否與TP

4、O具有相同的生物活性，在前期研究成果的基礎上，克隆了人核遷移蛋白(hNUDC)和小鼠核遷移蛋白(mNUDC)基因，在畢赤酵母表達系統(tǒng)中表達了hNUDC和mNUDC，通過金屬親和層析柱純化出了蛋白hNUDC-His和mNUDC-His，并且對hNUDC和mNUDC的生物活性作進一步的研究。 首先以人臍血CD34+細胞無血清液體培養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)hNUDC-His可以顯著增加巨核細胞的數(shù)目和促進巨核細胞的成熟。并且在無血清半固體培養(yǎng)時可以刺

5、激形成巨核細胞集落(CFU-MK)。流式細胞檢測結果顯示出hNUDC-His可以明顯增加巨核細胞的DNA倍性和體外產生的血小板的數(shù)量。在正常小鼠和骨髓抑制小鼠體內注射的實驗中，進一步證明了hNUDC-His具有提高體內血小板數(shù)量的作用。 接著在以鼠巨核細胞研究mNUDC-His的活性時發(fā)現(xiàn)mNUDC-His具有體外促進巨核細胞的成熟，體內促進血小板升高的作用。mNUDC-His顯示出了與hNUDC-His同樣的生物活性。