小鵝瘟病毒單克隆抗體的制備及膠體金診斷試紙的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本實驗參照李茂祥老師的方法，采用2.2﹪NaCl、6﹪PEG濃縮病毒，Sepharose-4B柱層析，提純病毒抗原。用該抗原免疫6～8周齡Balb/C小鼠，進行四次免疫。選擇免疫效價高的小鼠脾細胞與SP2/0骨髓廇細胞進行細胞融合，78孔有融合細胞生長，融合率約為21﹪。用間接ELISA法篩選出8孔能分泌抗GPV的單克隆抗體，陽性率約為10.26﹪。采用有限稀釋法進行3次克隆，經檢測和篩選最終獲得3株能夠穩(wěn)定分泌抗GPV的單克隆抗體的雜

2、交瘤細胞，命名為2B8、2B10和2H7。用膠體金標記制備好的GPV單克隆抗體2B8株，將馬抗GPV的多克隆抗體包被在NC膜的檢測線上，羊抗鼠抗體包被在陰性對照線上，建立檢測小鵝瘟病毒的膠體金免疫層析試紙條。試紙條的樣品端插入待檢樣品液體中，取出后平放，5分鐘后觀察結果。結果只在對照線(C)上出現一條紅線，表示為陰性結果；在檢測線(T)和對照線(C)上出現兩條紅線，表示為陽性結果。本實驗通過對實驗條件的摸索，選用pH8.20.1﹪PEG

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