富氫水聯(lián)合丙泊酚后處理對(duì)乳鼠離體腦片谷氨酸損傷后保護(hù)作用的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:1、研究富氫水對(duì)乳鼠離體腦片谷氨酸損傷后的保護(hù)作用,并探討其在乳鼠離體腦片損傷后保護(hù)作用的最佳濃度;2、研究富氫水(hydrogen-rich water)聯(lián)合丙泊酚(propofol)后處理對(duì)谷氨酸(L-Glutamic Acid,Glu)致乳鼠離體腦片損傷的保護(hù)作用,并探討其機(jī)制。
  方法:1、切取并培養(yǎng)出生7天的SD大鼠乳鼠離體腦片,隨機(jī)分為10個(gè)小組。實(shí)驗(yàn)分兩個(gè)步驟進(jìn)行。第一步:探索富氫水最佳保護(hù)濃度,5個(gè)小組分別

2、為:25μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組(HL25+Glu組)、50μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組(HL50+Glu組)、100μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組(HL100+Glu組)、200μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組(HL200+Glu組)、300μmol/l富氫水+谷氨酸損傷組(HL300+Glu組);第二步,探討富氫水聯(lián)合丙泊酚的保護(hù)作用,5個(gè)小組分別為:正常對(duì)照組,Glu損傷組(Glu損傷組),3 mg/L丙泊酚處理組(

3、PL3+Glu處理組),100μmol/l富氫水后處理組(HL100+Glu處理組),富氫水丙泊酚聯(lián)合組(HL100+ PL3+Glu處理組)。每組12例。將Glu損傷組、HL25+Glu組、HL50+Glu組、HL100+Glu組、HL200+Glu組、HL300+Glu組及PL3+Glu、HL100+Glu、HL100+ PL3+Glu處理組均培養(yǎng)至第六天,用含1 mmol/L Glu的培養(yǎng)基損傷30min,建立缺血再灌注模型,損傷

4、后將Glu損傷組移入正常的完全培養(yǎng)基,將HL25+Glu組、HL50+Glu組、HL100+Glu組、HL200+Glu組、HL300+Glu組及PL3+Glu、HL100+Glu、HL100+ PL3+Glu處理組分別移入含相應(yīng)處理藥物的完全培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng),每3小時(shí)換液一次,共8次,24小時(shí)。不同富氫水濃度組檢測(cè)尼氏小體數(shù)量,藥物處理組檢測(cè)蘇木素一伊紅(HE)染色,尼氏小體計(jì)數(shù)、乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase

5、LDH)釋放率、堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)數(shù)目的測(cè)定來(lái)比較各組腦片神經(jīng)細(xì)胞的損傷程度。
  結(jié)果:1、與富氫水其他濃度組相比,濃度為100μmol/l的富氫水后處理組的尼氏小體數(shù)量最多;2、與正常對(duì)照組相比,Glu損傷后的各組腦片中神經(jīng)細(xì)胞均受到一定程度的損傷,表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)量減少,細(xì)胞膜破碎,胞核皺縮,LDH釋放率、bFGF數(shù)量明顯增高;尼氏小體數(shù)量減少;3、與Glu損傷組相比,富氫水及丙泊酚后處理的各組,均能改善腦片中神經(jīng)細(xì)

6、胞形態(tài)結(jié)構(gòu)受損的情況,細(xì)胞膜破損減輕,胞核較完整,均能使尼氏小體數(shù)量增加,LDH釋放率及bFGF數(shù)量降低,而兩者之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;4、富氫水聯(lián)合丙泊酚后處理組的尼氏小體數(shù)量較丙泊酚藥物后處理組增加,LDH釋放率及bFGF數(shù)量均降低;與100μmol/l的富氫水后處理組相較,藥物聯(lián)合組的尼氏小體數(shù)量增加,而LDH釋放率及bFGF數(shù)量均增加。
  結(jié)論:1、不同濃度的富氫水對(duì)谷氨酸介導(dǎo)的乳鼠離體腦片損傷確有一定的保護(hù)作用,其中以

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