1、目的:膿毒癥(sepsis)是由感染因素所導致的嚴重的全身炎癥反應綜合征。其發(fā)病率高，病情重，救治難度大，死亡率高達50％。自青霉素發(fā)現(xiàn)至今人們對膿毒癥的認識已從關(guān)注感染本身發(fā)展到關(guān)注全身炎癥反應這導致病情加重的病理生理過程之上，發(fā)現(xiàn)控制膿毒癥引發(fā)的過度炎癥反應和免疫功能紊亂才是治療的關(guān)鍵。
　　 單核/巨噬細胞作為重要免疫效應細胞，生成多種炎癥反應細胞因子，對膿毒癥免疫反應和炎癥反應起著至關(guān)重要的影響。通過干預改變細胞細胞因子

2、表達可能是影響炎癥反應的重要途徑。辛伐他汀的抗炎作用已得到初步證實，但其抗炎機制尚不清楚。辛伐他汀是否通過單核/巨噬細胞系統(tǒng)來影響炎癥反應尚未明確證實，進一步了解該藥物對單核/巨噬細胞治療過程中的凋亡狀態(tài)對于研究膿毒癥的治療有著重要的意義。
　　 炎癥反應中氣體一氧化氮（nitricoxide，NO）、一氧化碳(carbonmonoxide，CO)及硫化氫(hydrogensulfide，H2S)是重要的信號轉(zhuǎn)導分子，這三種氣體

3、信號分子也被認為是炎癥反應中的3種重要的炎癥介質(zhì)，分別與其主要的合成酶誘導型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)、血紅素加氧酶(hemeoxygenase-1，HO-1)和胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-gamma-lyase，CSE）形成獨立又相互聯(lián)系的體系(NO/iNOS體系、CO/HO-1體系、H2S/CSE體系)在許多的研究中被證實和膿毒癥炎性反應有著密切的關(guān)系，對于

4、維持促炎和抗炎因子的平衡發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，通過干預和調(diào)節(jié)這三種氣體信號分子在炎癥反應中的表達可以明顯減輕膿毒癥的炎癥反應損傷，維持膿毒癥的血流動力學指標穩(wěn)定。
　　 近年來越來越多的文獻表明，他汀類藥物可以通過抑制iNOS的合成從而減少NO的產(chǎn)生，改善膿毒癥或感染性休克的中毒癥狀。而關(guān)于他汀類藥物藥物改善膿毒癥或感染性休克的癥狀是否也通過除NO外的其他氣體信號分子發(fā)揮相應的作用目前尚不太清楚，他汀類藥物對膿毒癥單核/巨噬細胞凋亡

5、的影響也缺乏相關(guān)的研究。
　　 本研究通過脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激小鼠巨噬細胞系RAW264.7細胞體外模擬內(nèi)毒素炎癥模型進一步研究辛伐他對iNOS/NO、HO-1/CO及CSE/H2S的表達的影響，從而確定辛伐他汀對氣體信號傳導通路的影響，觀察辛伐他汀對細胞凋亡的影響，探討辛伐他汀抗炎作用機制，以進一步闡明辛伐他汀在膿毒癥及感染性休克治療的作用。
　　 方法:本研究選用小鼠巨噬細胞系R

6、AW264.7細胞作為研究對象，通過脂多糖LPS刺激RAW264.7細胞建立體外內(nèi)毒素炎癥模型。實驗分組前首先取正常對數(shù)生長期細胞用MTT法選擇合適的辛伐他汀作用濃度，然后進行實驗分組:Ⅰ組（對照組）:完全無血清培養(yǎng)基孵育;Ⅱ組（模型組）:在無血清培養(yǎng)基中加入濃度為1μg/ml的LPS進行孵育;Ⅲ組（辛伐他汀組）:完全無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入辛伐他汀20μmol/1，2h后加入1μg/ml的LPS孵育，細胞培養(yǎng)18小時后(1)用反轉(zhuǎn)錄-

7、聚合酶鏈反應法(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)觀察iNOSmRNA、HO-1mRNA、CSEmRNA在各組的表達，以目的基因與內(nèi)參的平均光密度比值進行半定量分析;用完全單因素方差分析對于RT-PCR結(jié)果進行統(tǒng)計學分析。(2)用膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶（AnnexinV-fluoresceinisothiocyanate/ProdiumIodidedou

8、blestaining,AnnexinV-FITC/PI)雙染法檢測早期細胞凋亡變化。
　　 結(jié)果:
　　 1、RT-PCR結(jié)果:
　　 1.1、iNOS表達比較:實驗對照組、LPS組和辛伐他汀干預組的iNOS表達，通過方差分析三組之間存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。進行組組間的比較:LPS組iNOS表達明顯高于實驗對照組且差異具有顯著性(P＜0.05);辛伐他汀干預組iNOS表達低于LPS組，差異具有顯著性(P

9、＜0.05);辛伐他汀干預組iNOS表達高于實驗對照組，差異具有顯著性(P＜0.05)
　　 1.2、HO-1表達比較:實驗對照組、LPS組和辛伐他汀干預組的HO-1表達，通過方差分析三組之間存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。進行組組間的比較:LPS組HO-1表達明顯高于實驗對照組且差異具有顯著性(P＜0.05);辛伐他汀干預組HO-1表達高于LPS組，差異具有顯著性（P＜0.05）;辛伐他汀干預組HO-1表達高于實驗對照組，差異

10、具有顯著性(P＜0.05)。
　　 1.3、CSE表達比較:實驗對照組、LPS組和辛伐他汀干預組的CSE表達，通過方差分析三組之間存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。進行組組間的比較:LPS組CSE表達明顯高于實驗對照組且差異具有顯著性(P＜0.05）;辛伐他汀干預組CSE表達低于LPS組，差異具有顯著性(P＜0.05);辛伐他汀干預組CSE表達高于實驗對照組，差異具有顯著性(P＜0.05)。
　　 2、AnexinV-FI

11、TC&PI雙染法檢測凋亡:實驗對照組、LPS組、辛伐他汀干預組通過采用單因素方差分析，三組之間的早期凋亡率存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。進行組組間的比較:LPS組早期凋亡率明顯高于實驗對照組，且差異具有顯著性(P＜0.05);辛伐他汀干預組早期凋亡率高于LPS組，差異具有顯著性(P＜0.05);辛伐他汀干預組早期凋亡率高于實驗對照組，且差異具有顯著性（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1、LPS刺激巨噬細胞后iNO