1、棉鈴蟲是一種世界性農(nóng)業(yè)害蟲。自20世紀80年代以來，棉鈴蟲對擬除蟲菊酯類殺蟲劑(簡稱菊酯類殺蟲劑)產(chǎn)生抗藥性并呈現(xiàn)一定程度的上升趨勢。大量研究表明昆蟲細胞色素P450酶系介導的代謝能力增強是棉鈴蟲產(chǎn)生抗藥性的主要機制。深入研究抗性棉鈴蟲細胞色素P450，有助于明確棉鈴蟲對菊酯類殺蟲劑的抗性分子機理，并為細胞色素P450基因的異源表達奠定基礎。 敏感性測定結(jié)果表明，棉鈴蟲敏感品系對不同菊酯類農(nóng)藥的敏感性不同，所測定的7種菊酯類殺蟲

2、劑對其致死中量(LD50)為0.0101～0.0982μg/頭。而用氰戊菊酯繼續(xù)汰選抗性品系棉鈴蟲12代后，該殺蟲劑對試蟲的LD50為24.5754μg/頭，抗性倍數(shù)達到了250.25倍。增效實驗發(fā)現(xiàn)胡椒基丁醚(簡稱PBO)處理棉鈴蟲抗性品系對氰戊菊酯具有131.28倍的增效作用，說明棉鈴蟲抗性品系對氰戊菊酯的抗性與P450酶系相關(guān)。交互抗性測定結(jié)果表明，棉鈴蟲對不同結(jié)構(gòu)的菊酯類殺蟲劑的交互抗性水平存在顯著差異，抗性倍數(shù)在6.54～23

3、.35倍之間。 為深入了解細胞色素P450在棉鈴蟲抗藥性中的作用，我們根據(jù)已知的細胞色素P450CYP6B7(AF031468)基因的核苷酸序列設計特異性引物，以抗性品系棉鈴蟲六齡中期幼蟲的中腸組織總RNA為模板，采用RT-PCR克隆出了CYP6B7基因片段，并已在GeneBank中注冊，登錄號為DQ497428。該序列全長為1557bp，其中編碼區(qū)為1515bp，編碼504個氨基酸殘基。該片段與已知的棉鈴蟲CYP6B7(AF0

4、31468)基因?qū)Ρ?，核苷酸、氨基酸的同源性分別為97.75％和98.81％，有35個核苷酸發(fā)生突變，引起6個氨基酸變異(Y68D、F87L、H88D、M180T、K355R和T486I)。 采用半定量RT-PCR方法比較了CYP6B7mRNA在敏感和抗性品系棉鈴蟲六齡中期幼蟲的中腸組織中的表達量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗性品系中能檢測到目的基因片段，而敏感品系沒有檢測到該基因片段，初步表明CYP6B7在敏感和抗性品系棉鈴蟲六齡中期幼蟲的中腸