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![多波長激光誘導豚鼠形覺剝奪性高度近視脈絡膜新生血管模型建立的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/614c2a4f-c5e1-49b5-9dd4-eaa314b7a681/614c2a4f-c5e1-49b5-9dd4-eaa314b7a6811.gif)
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文檔簡介
1、目的:探討多波長激光誘導的形覺剝奪性高度近視豚鼠脈絡膜新生血管模型建立的可行性。
方法:1.多波長激光擊破Bruch’s膜:3周大雄性雙眼屈光參差大于6.00D三色豚鼠9只(18眼)分為激光后7d,14d,28d三組,雙眼A-Scan測量眼軸,取每只鼠近視屈光度更高眼作為實驗眼,另一側眼為對照眼。采用多波長激光(532nm)擊破Bruch’s膜對豚鼠雙眼行視網膜光凝,激光功率、光斑直徑、曝光時間分別為400mW、50μm、0.
2、1s,每只眼在視盤上方行8個光凝斑點。于光凝后三個時間點行眼底彩照和吲哚青綠血管造影(indocyaninegreenangiography,ICGA),檢查后處死豚鼠,摘取眼球制作標本,進行脈絡膜鋪片及組織病理學觀察。
2.多波長激光不擊破Bruch’s膜:3周大雄性雙眼屈光參差小于2.00D三色豚鼠30只,在右眼面罩法形覺剝奪誘導近視6周后,多波長激光(532nm)不擊破Bruch’s膜雙眼光凝,分為光凝后7d,14d,2
3、8d三組,激光功率為120mW,直徑200μm,曝光時間為0.1s,每只眼在視盤上方行10個光凝斑點。各組分別于光凝后三個時間點行眼底彩照和ICGA,檢查后處死豚鼠,摘取眼球制作標本,進行脈絡膜鋪片及組織病理學觀察,并通過免疫組化等分子生物學方法分析VEGF,MMP-2等因子在實驗眼和對照眼視網膜等組織的蛋白表達情況。
結果:1.光凝后7d出現CNV,14d達高峰,28d出現瘢痕化。以ICGA激光斑熒光充盈為準,14天時造模成
4、功率為66.7%,且此時光鏡下可見視網膜下CNV形成,脈絡膜鋪片可見激光斑邊緣呈網簇狀高熒光斑,半定量分析三個時間點CNV面積,實驗眼CNV面積均大于對照眼,且14d時,實驗眼CNV面積最大,28d時,雙眼CNV面積均減小。
2.面罩法形覺剝奪4周后誘導出>-6.00D的近視,戴面罩眼眼軸較對照組明顯增長,且主要是玻璃體腔延長。激光光凝后,ICGA三個時間點激光斑均可見;脈絡膜鋪片和光鏡下均可見在視網膜下7d出現CNV,14d
5、CNV達高峰,28d出現瘢痕化;免疫組化結果顯示形覺剝奪眼VEGF在脈絡膜毛細血管處高表達,MMP-2在視網膜色素上皮層處表達更多。
結論:多波長激光擊破Bruch’s膜可以誘導豚鼠CNV,并且屈光度高的豚鼠實驗眼CNV面積比屈光度低的對照眼大,可能是由于屈光度高的實驗眼眼軸增長導致視網膜變薄,從而為新生血管生長提供了更多的缺血缺氧等條件。多波長激光不擊破Bruch’s膜可以在已經誘導出高度近視的豚鼠眼上誘導出CNV,VEGF
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